[发明专利]一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法

权利要求书

1.一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备腺病毒液；

2)制备腺病毒卵黄抗体；

3)将所述腺病毒液与腺病毒卵黄抗体混合后对鸡进行免疫注射。

2.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于所述腺病毒液中的抗原成为为腺病毒I群血清4型。

3.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤3)所述腺病毒液中病毒效价为10^8.5TCID₅₀、10^8.0TCID₅₀或10^7.5TCID₅₀。

4.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤3)所述腺病毒卵黄抗体中抗体效价为1:4、1:8或1:16。

5.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤3)中腺病毒液与腺病毒卵黄抗体的混合体积比是1:1。

6.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤3)中所述注射的剂量是0.5mL。

7.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤3)中腺病毒液与腺病毒卵黄抗体混合后先加入油佐剂乳化，油水混合制剂型，而后再对鸡进行免疫注射。

8.根据权利要求2所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤1)所述腺病毒液是通过以下方法制备的：取分离鉴定株腺病毒I群血清4型，用灭菌生理盐水10倍稀释病毒液，接种已长满单层的鸡胚成纤维细胞，待细胞病变达到80％时，收获，反复冻融三次，测得的病毒含量为10^8.0TCID₅₀，将检验合格的冻融液浓缩4倍后，为免疫原。

9.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤2)所述腺病毒卵黄抗体是通过以下方法制备的：

A)制备腺病毒灭活疫苗；

B)取120日龄蛋鸡，每只胸部肌肉注射步骤A)所述疫苗2ml，10日后每只胸部肌肉再注射步骤A)所述疫苗2ml，10日后每只胸部肌肉再注射步骤A)所述疫苗2ml；

C)取步骤B)三免后的鸡卵，制备卵黄抗体。

10.根据权利要求9所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法，其特征在于步骤C)所述制备卵黄抗体，具体包括以下操作：将分离的蛋黄搅拌成均匀膏状，加入等体积注射用水，搅拌均匀后，65℃加热灭活30分钟；加入6倍量酸化水，重复3组；将各组降温至1～4℃；4℃静置2～5小时，14000转离心取上清；加入正辛酸终浓度为0.3％，室温放置5～12小时；卵黄液用孔径为0.45μm滤器过滤澄清，再用0.22μm滤器过滤除菌；经截留分子量为100KD超滤膜堆进行浓缩；加入终浓度为0.2％甲醛溶液，室温放置24小时，期间振摇4～6次。