[发明专利]AR信号通路抑制剂及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种AR信号通路抑制剂及其应用。

背景技术

雄激素在男性的一生中都具有非常重要的生理作用，雄激素的作用由雄激素受体(AR)介导，研究表明，AR信号通路的异常与前列腺癌(PCa)、良性前列腺增生(BPH)、肯尼迪病(Kennedy disease)、男性不育、雄激素不敏感征(AIS)以及男性乳癌等疾病的发生、发展有密切的关系，因此，AR信号通路的分子组成、数量、结构、功能以及与其它信号通路的联系一直是泌尿外科领域的研究热点。

前列腺癌发病机制的学说众多，其中“基质上皮间串扰”(crosstalk between stroma-epithelium)在前列腺生长发育及病变过程中的作用已经得到学界公认。前列腺基质和上皮相互作用在前列腺疾病发生发展中起着十分重要的作用。前列腺为雄激素依赖性器官，AR信号系统对于前列腺癌的发生发展起着非常重要的作用，基质细胞AR通过调节相关细胞因子的变化影响前列腺上皮的恶变及转移。基质微环境中的可溶性细胞因子在基质上皮间串扰中发挥着重要的作用，可溶性细胞因子与相应受体结合后可以与其他信号分子相互作用(细胞外基质、整合素)，一些细胞因子可以与雄激素及雄激素受体相互作用，这些协同作用可能引发前列腺组织癌变、进展以及局部肿瘤生长和远处转移。因此，充分认识可溶性细胞因子与AR通路之间的相互作用，对我们研究前列腺癌的发病机制有着重要的作用，以AR为靶点的内分泌治疗将是前列腺癌的一种重要的临床治疗方式。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种AR信号通路抑制剂，所述抑制剂在人细胞中具有抗雄活性，能够抑制雄激素依赖的细胞增殖，降低AR的下游靶向基因的表达；所述抑制剂能够与HSP90的分子伴侣FKBP51蛋白口袋稳定结合，与FKBP51相互作用的氨基酸残基主要是疏水残基并且与AR相互做用的位点是相互重叠的。

所述AR信号通路抑制剂是化合物对硝基酚(PNP)，其结构式如下：

本发明的另一目的是提供上述AR信号通路抑制剂的用途，通过实验证明了以上所示信号通路抑制剂能够用于制备治疗与AR信号通路异常激活有关的肿瘤药物。

上述的信号通路抑制剂及其有机盐或无机盐在制备治疗与AR信号通路异常激活有关的肿瘤药物、制备治疗肯尼迪病的药物或制备AR信号通路抑制剂中的用途。所述的肿瘤为前列腺癌。

本发明还提供了药物组合物，是以上述信号通路抑制剂及其有机盐或无机盐添加药学上可以接受的辅助性成分制备而成的。该药物组合物具有抑制AR信号通路的作用。

本发明还提供了筛选改善或治疗前列腺癌的潜在物质的方法，包括以下步骤：

⑴用候选物质处理包含AR信号通路的前列腺癌细胞体系；

⑵通过实时定量PCR实验检测AR调控的五种基因PSA、FKBP51、KLK2、TMPRSS2、S100P在存在或者不存在候选物质的条件下的基因转录水平的表达，使用DHT激活AR信号通路，其中，不存在候选物质的条件为对照组，存在候选物质的条件为测试组，若测试组中AR调控的全部五种基因的表达量均低于对照组的，则表明该候选物质是改善或治疗前列腺癌的潜在物质。

本发明的有益技术效果：本发明首次揭示了化合物对硝基酚在人细胞中具有抗雄活性，能够抑制雄激素依赖的细胞增殖，降低AR的下游靶向基因的表达，通过实验证明了对硝基酚对AR信号通路有抑制作用，可用于制备前列腺癌的药物。本发明为前列腺癌的治疗提供了一种新的选择。

附图说明

图1、前列腺癌细胞LNCaP和22Rv1作为体内模型检测PNP在人源细胞的抗雄活性

其中，■：LNCaP细胞；●：22Rv1细胞；用MTT法检测细胞活性(cell viability)。

图2、PNP通过FKBP51蛋白抑制AR活性

LNCaP细胞在血清饥饿处理后加入30μM的PNP和1nM DHT孵育12小时，采用实时定量RT-PCR检测FKBP51(A)，PSA(B)，KLK2(C)，S100P(D)，TMPRSS2(E)表达水平，相对表达水平数据用三次实验平均值±标准误差表示，***p<0.001。

图3、(A)不同浓度PNP处理FKBP的荧光光谱

a：未配合的FKBP51作为阴性对照；b-g：对用10、20、40、60、80、100μM的硝基苯酚分别处理FKBP51，最后的荧光光谱表示对硝基苯酚的固有荧光强度