[发明专利]一种促进灵芝液体发酵产胞外多糖的方法

说明书

本发明公开了一种促进灵芝液体发酵产胞外多糖的方法，属于微生物发酵领域。本发明方法为灵芝的液体浅层发酵，通过控制发酵培养基液面高度0.1～5cm，提高灵芝多糖的产量。本发明的方法与固态发酵相比发酵周期较短，与液态发酵相比不严格需要搅拌、通气等设备，降低设备和生产成本，单位菌体的多糖产量显著提高，由0.086g/g菌体提高至0.243g/g菌体，提高了1.83倍，更利于工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种促进灵芝液体发酵产胞外多糖的方法，属于微生物发酵领域。

背景技术

灵芝(Ganoderma lucidum)是世界上最著名的大型担子菌，具有很高的营养价值和保健作用。灵芝多糖是灵芝的主要活性物质之一，分为灵芝子实体和灵芝菌丝体中的灵芝胞内多糖以及灵芝液体培养基中的灵芝胞外多糖。目前，灵芝的培养方式为固体发酵和深层液体发酵，传统的固态发酵方式可以获得灵芝子实体，进而可以提取多糖等活性物质，生产成本较低，但是固体发酵产量小，耗费人力，周期较长，已经不能满足人们日以增进的需求；液体深层发酵技术培养灵芝，大大增加了菌丝体、多糖等活性物质的产量，成为现代灵芝发酵的主要方式，但是液体深层发酵过程中的搅拌、通气、无菌控制等操作加大了灵芝多糖的生产成本，使灵芝以及多糖等活性物质的价格居高不下。因此，寻找与发现一种生产成本低、多糖产量高，又可以实现工业化生产的方法是灵芝多糖研究的重要方向之一。

发明内容

本发明的目的是提供一种促进灵芝液体发酵产胞外多糖的方法，所述方法是将灵芝接种至发酵培养基进行浅层发酵；所述浅层发酵是控制发酵过程培养基的液面高度为0.1～5cm。

在本发明的一种实施方式中，所述浅层发酵是控制发酵过程培养基的液面高度为0.5～5cm。

在本发明的一种实施方式中，所述接种是每100ml发酵液接种菌丝体湿重为0.2-1.0g的种子液。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵过程控制发酵温度为20-33℃。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵培养基每L含有：葡萄糖15～25g，胰蛋白胨4～8g，无氨基酵母4～6g，七水硫酸镁1～3g，磷酸二氢钾2～4g，初始pH 5.5～6.5。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵培养基每L含有：葡萄糖20g，胰蛋白胨5g，无氨基酵母5g，七水硫酸镁2g，磷酸二氢钾3g，初始pH 6。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵为好氧发酵，发酵过程中需要与外界进行气体交换。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵为静置培养发酵。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵过程每6～48h对发酵培养基进行搅拌、摇动。

在本发明的一种实施方式中，所述发酵过程每6～48h对发酵培养基进行150～250rpm搅拌5～15min。

在本发明的一种实施方式中，所述灵芝替换为除灵芝外的其它食用、药用真菌。

本发明还提供所述方法在以包括灵芝在内的食用、药用真菌生产胞外多糖中的应用。

本发明还提供所述方法生产的灵芝胞外多糖，所述方法生产的胞外多糖中葡萄糖含量占总组分的比例≤80％，具有抑制肿瘤细胞活性、抗氧化等生物活性。

有益效果：本发明的方法与固态发酵相比发酵周期较短，与液态发酵相比不严格需要搅拌、通气等设备，降低设备和生产成本，单位菌体的多糖产量显著提高，由0.086g/g菌体提高至0.243g/g菌体，提高了1.83倍，更利于工业化生产。

具体实施方式

生物量测定：发酵液过滤后，菌丝体于60℃烘干至恒重。