[发明专利]利用组培苗叶片再生不定芽快速繁育羊踯躅的方法

权利要求书

1.一种利用组培苗叶片再生不定芽快速繁育羊踯躅的方法，其特征在于，具体步骤如下：

A）剪取羊踯躅无菌组培苗顶生第三到第五个叶片，对叶片垂直于主脉切割一刀并去除叶柄和叶梢；

B）将叶片置于不定芽诱导培养基上，暗培养10-15天后进行光照培养；

C）光照培养35天后，将带不定芽的叶片转到不定芽生长培养基上进行继代培养，30 d后形成幼苗；

D）将幼苗切下，转移到成苗和生根培养基上，30 d后，幼苗发育成具有根、茎、叶的完整再生植株；

各步骤培养基配方如下：

不定芽诱导培养基：WPM培养基中加入终浓度为1.0 mg/L的细胞分裂素噻苯隆、终浓度为1.0 mg/L的生长素吲哚乙酸、终浓度为30 g/L的蔗糖；

不定芽生长培养基：WPM培养基中加入终浓度为1.0 mg/L的细胞分裂素玉米素、终浓度为0.1-0.5 mg/L的生长素吲哚丁酸、终浓度为30 g/L蔗糖；

成苗和生根培养基：在1/2 WPM培养基中，加入终浓度为10-12.5 mg/L的生长素吲哚丁酸、终浓度为15 g/L的蔗糖、终浓度为0.3g/L的活性炭；

上述培养基均在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值至5.8。

2.根据权利要求1所述利用组培苗叶片再生不定芽快速繁育羊踯躅的方法，其特征在于，所述光照培养是指，光照强度为1500 lx，光照时间为12 h/d；培养室温度为25±2℃。

3.根据权利要求1或2所述利用组培苗叶片再生不定芽快速繁育羊踯躅的方法，其特征在于：步骤A）所述羊踯躅无菌组培苗是这样获得的：剪取当年羊踯躅带有4~6个侧芽的新发枝条3~5cm 通过组织培养方法获得羊踯躅无菌组培苗。