[发明专利]共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子及制备方法

权利要求书

1.一种共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子的制备方法，其特征是包括如下步骤：

(1)将6-醛基化β-环糊精、聚-L-赖氨酸氢溴酸盐溶于pH＝4.4的醋酸盐缓冲溶液中，室温搅拌1-2h，加入氰基硼氢化钠，室温继续搅拌48～72h；加氢氧化钠水溶液使体系呈中性，在半透膜截留分子量为7000Da的条件下超纯水透析2d、透析液冷冻干燥获得聚赖氨酸接枝β-环糊精衍生物；所述聚赖氨酸接枝β-环糊精衍生物简称PLCD；

所述聚-L-赖氨酸氢溴酸盐粘均分子量为15000～30000Da；

以赖氨酸结构单元计的聚-L-赖氨酸氢溴酸盐、6-醛基化β-环糊精和氰基硼氢化钠的摩尔比为1:(0.5～2):4；

(2)按质量比为1:(0.3～0.5)的比例，将PLCD与疏水性化疗药物溶解于二甲基亚砜中，室温搅拌8～12h，在半透膜截留分子量为8000～14000Da的条件下纯水透析24h、冷冻干燥，得到载化疗药物的纳米粒子；

(3)将载化疗药物的纳米粒子与核酸分别溶于DEPC水中，调节两种溶液的浓度使载化疗药物的纳米粒子与核酸的N/P摩尔比为30～50:1，将二者等体积混合，涡旋震荡20～30s，经室温静置孵育30～60min，得共载化疗药物和核酸的纳米粒子；

(4)将共载化疗药物和核酸的纳米粒子滴加于质量浓度为0.75～1.0mg/mL的透明质酸水溶液中，在200-400rpm的条件下，搅拌5-10min，得共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子；透明质酸与共载化疗药物和核酸的纳米粒子的质量比为(3～4):6。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述的疏水性化疗药物为阿霉素、喜树碱或紫杉醇。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述的核酸为质粒DNA、小干扰RNA或microRNA。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征是所述质粒DNA为质粒pEGFP-C1。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征是所述小干扰RNA为c-myc siRNA，所述c-mycsiRNA核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征是所述microRNA为miR-122，所述miR-122核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是所述的透明质酸分子量为20000～40000Da。

8.权利要求1～7之一的方法制备的共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子。

9.权利要求8的共载化疗药物和核酸的肿瘤靶向纳米粒子在制备抗肝癌或抗乳腺癌药物中的应用。