[发明专利]利用PCR-RFLP检测绵羊FTH-1基因单核苷酸多态性的方法及其应用

权利要求书

1.一种绵羊FTH-1基因的单核苷酸多态性的检测方法在绵羊辅助选择和分子育种中的应用，其特征在于：所述的绵羊FTH-1基因的单核苷酸多态性的检测方法，包括以下步骤：

以待测绵羊全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增绵羊FTH-1基因片段；用限制性内切酶XspI酶切PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳；根据电泳结果鉴定绵羊FTH-1基因上单核苷酸多态性位点的基因型；

所述的引物对P为：

上游引物：5’- TCCATAGTAGAGACGGTTCC -3’ ；

下游引物：5’- GCACAAAAGACTAAAGCCC -3’ ；

所述的单核苷酸多态性位点表现为A或G的单核苷酸多态性，具有AA、AG以及GG三种基因型，电泳结果分别为：AA型表现为152 bp和326 bp两个条带；AG型表现为478 bp、326 bp和152 bp三个条带；GG型表现为478 bp一个条带；

所述绵羊选自湖羊，GG基因型为一个提高产羔性状育种速度的分子遗传标记。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：建立基因型为GG纯合型的绵羊群体，提高绵羊产羔率。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸30 s，34个循环；72℃延伸10 min。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的琼脂糖凝胶的质量浓度为1.5-3.0%。