[发明专利]一种NADPH的分离纯化方法有效
| 申请号： | 201611089629.3 | 申请日： | 2016-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN108132318B | 公开（公告）日： | 2021-03-09 |
| 发明（设计）人： | 秦正红;孙玮;朱鹏 | 申请（专利权）人： | 山东蓝康药业股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/89 |
| 代理公司： | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人： | 张倩倩;李敏 |
| 地址： | 255400 山东省淄*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 nadph 分离 纯化 方法 | ||
1.一种NADPH的分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
将NADPH粗品溶液过滤，得供试品溶液；将所述供试品溶液通过反相柱层析纯化，梯度洗脱，HPLC检测，收集，浓缩，干燥，即得；
所述反相柱层析的介质为C18，颗粒度为10-100μm，粒径为色谱柱为Sepax GP-C18，以8～12mM NaH2PO4缓冲液为流动相A，以体积分数为100％的甲醇为流动相B，柱温为15℃，流速为40mL/min，检测波长为260nm，
所述梯度洗脱的具体程序为：0-10min，A：B的体积比为95％：5％；10-40min，A：B的体积比为90％：10％；40-60min，A：B的体积比由90％：10％→40％：60％；60min，A：B的体积比为60％：40％。
2.根据权利要求1所述的NADPH的分离纯化方法，其特征在于，
以10mM NaH2PO4缓冲液为流动相A，以甲醇为流动相B。
3.根据权利要求1或2所述的NADPH的分离纯化方法，其特征在于，
所述梯度洗脱前还包括以下步骤：先用体积分数为100％的甲醇进行活化洗脱30min，再用A：B的体积比为95％：5％的流动相进行平衡洗脱35min。
4.根据权利要求1或2所述的NADPH的分离纯化方法，其特征在于，
以重量百分含量计，所述NADPH粗品溶液中，主要含有以下成分：NADPH的含量为60～70％，NADP的含量为10～20％，葡萄糖的含量为10～15％，未知杂质的含量为5-10％。
5.根据权利要求3所述的NADPH的分离纯化方法，其特征在于，
以重量百分含量计，所述NADPH粗品溶液中，主要含有以下成分：NADPH的含量为60～70％，NADP的含量为10～20％，葡萄糖的含量为10～15％，未知杂质的含量为5-10％。
6.根据权利要求1、2或5中任一项所述的NADPH的分离纯化方法，其特征在于，采用0.45μm微孔滤膜进行过滤。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东蓝康药业股份有限公司，未经山东蓝康药业股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201611089629.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
