[发明专利]有机胂类磁性分子印迹聚合物的制备方法及其应用

权利要求书

1.有机胂类磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：

（1）取可溶性铁盐溶解于超纯水中，在通入氮气保护下，采用超声波对溶液进行混匀，制得Fe³⁺和Fe²⁺摩尔浓度相同，且均为0.05-0.2mol/L的混合溶液，然后，按照每100mL超纯水中添加8-15mL氨水和0.5-3.0mL油酸的比例，向混合溶液中依次加入氨水和油酸，之后，将所得混合溶液于90℃条件下进行加热反应1-2h，反应结束后，过滤，对所得滤渣先用去离子水冲洗至中性，再用无水乙醇清洗2-4次，清洗后将滤渣置于温度为50-80℃的真空干燥箱内干燥至恒重，得磁性微粒，备用；

（2）取功能单体10-15mol以及步骤（1）制得的磁性微粒1.0g溶解于10-30mL水中，超声处理15min混匀，得到混合溶液A，然后，按照每100mL甲醇1-1.5g的添加比例，取乳化剂添加于甲醇中，得到混合溶液B，之后，按照混合溶液A和混合溶液B体积比为10:1-3的比例，将混合溶液A加入到混合溶液B中，超声处理10min混匀，得到混配溶液，之后，按照混配溶液中每100mL甲醇0.1-0.4g的添加比例，向混配溶液中加入过硫酸铵，将所得混合溶液在氮气保护下，以200-400r/min的速度在室温下进行搅拌2h，得到反相乳液A，备用；

（3）取0.2g引发剂溶解于1-5mL甲醇中，之后，向其中加入1.0mol的交联剂和1.0-5.0mol的功能单体，搅拌均匀后，进行超声震荡10min，之后，向所得的混合溶液中加入步骤（2）中制得的反相乳液A，超声处理10min后，得到反相乳液B，备用；

（4）取1mol的模板分子和2-6mol的功能单体溶解于100mL甲醇中，超声处理10min混匀后，放入4℃冰箱内进行预聚合8-12h，得到预聚合体系；

在上述步骤（2）、步骤（3）和步骤（4）中，所述的功能单体为N，O-双异丁烯酰乙醇胺、N，O-双异丁烯酰丝氨醇、N，O-双甲基丙烯酰-L-天冬氨酸、N，O-双甲基丙烯酰-L-谷氨酸、N，O-双甲基丙烯酰-L-组氨酸、N，O-双甲基丙烯酰-L-亮氨酸、N，O-双甲基丙烯酰-L-赖氨酸、N，O-双甲基丙烯酰-L-缬氨酸、N，O-双甲基丙烯酰-L-色氨酸以及其他的N，O-双甲基丙烯酰氨基酸衍生物中的至少一种；

（5）按照反相乳液B与预聚合体系体积比为10:1的比例，取步骤（3）制得的反相乳液B加入到步骤（4）制得的预聚合体系中，充分混合后，通入氮气10min，之后，置于60-80℃条件下进行反应12-15h，制得聚合物颗粒，备用；

（6）分别采用丙酮、乙醇和水对步骤（5）制得的聚合物颗粒进行反复洗涤，然后，采用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合溶液进行索氏抽提，期间定时对新流出的提取液进行取样，并采用高效液相色谱分析取样得到的提取液中模板分子的含量，直至提取液中无模板分子时停止索氏提取，然后，将聚合物颗粒置于70℃温度条件下烘干至恒重，即得对有机胂类具有识别能力的磁性分子印迹聚合物。

2.根据权利要求1所述的有机胂类磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于：在步骤（1）中，所述的可溶性铁盐为FeCl₃和 FeSO₄的水合物，或FeCl₃和FeCl₂的水合物，或Fe₂(SO₄)₃和FeSO₄的水合物。

3.根据权利要求1所述的有机胂类磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于：在步骤（2）中，所述的搅拌速度为300r/min。

4.根据权利要求1所述的有机胂类磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于：在步骤（3）中，所述的交联剂为二甲基丙烯酸乙二醇酯、二乙烯基苯、三甲基丙烷三甲基丙烯酸酯、季戊四醇三丙烯酸酯、季戊四醇四丙烯酸酯、马来松香丙烯酸乙二醇酯和四乙基氧硅烷中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的有机胂类磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于：在步骤（4）中，所述的模板分子为阿散酸、洛克沙胂、卡巴胂和硝苯胂酸中的任意一种。

6.利用权利要求1的制备方法所制备的有机胂类磁性分子印迹聚合物在动物性食品中有机胂类兽药残留的分析检测方法，其特征在于，具体步骤为：

（1）将浓度为1000μmol/L的有机胂类药物标准溶液分别加入到三份均质后的样品中，使三份样品中有机胂类药物的浓度分别为250μg/kg、500μg/kg和1000μg/kg；

（2）分别对三份样品进行匀浆处理，从三份匀浆后的样品中各取5g作为试样，将三份试样分别放入装有25mL甲醇的离心管中，并对离心管中的混合物进行超声破碎和涡旋混合各10min，离心15min，并取上清液，然后，向离心处理后取过上清液的剩余物料中再次加入25mL甲醇，并对所得混合物进行超声破碎和涡旋混合各10min，离心15min，再次取上清液，然后，合并两次所得上清液，并向合并后的溶液中加入4mL质量浓度为2%的高氯酸溶液，涡旋混合均匀后过滤，对所得滤液进行减压旋转蒸干，得固体残渣，用5mL甲醇对固体残渣进行溶解，得到样品溶液，备用；

（3）取30mg有机胂类磁性分子印迹聚合物加入到样品溶液中，将所得混合物置于振荡器中进行振荡15min，然后，利用磁铁对振荡后的混合物进行磁性分离，除去磁性分离后所得混合物中的上清液，剩余下层底物，采用体积比为8:2的甲醇-水混合溶液对下层底物进行淋洗，采用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合溶液对下层底物进行洗脱，并采用孔径为0.22μm的有机微孔滤膜对所得洗脱液进行过滤，得滤液，采用高效液相色谱仪对所得滤液中的有机胂类药物含量进行检测，即完成有机胂类药物从带有有机胂类药物的样品溶液中的分离和测定。