[发明专利]一种绵羊肺炎支原体低血清高效培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种绵羊肺炎支原体低血清高效培养基，其特征在于，每1000ml低血清高效培养基由基础培养基和辅助培养基组成；

所述基础培养基中含有以下组分：

（1）MEM6.0～7.0 g，

（2）丙酮酸钠5.0～6.0 g，

（3）葡萄糖5.0～6.0 g，

（4）质量浓度为1%的酚红2.0～2.5 ml，

（5）Hank’s液 500 ml，

（6）去离子水300 ml；

所述辅助培养基中含有以下组分：

（7）质量浓度为25%的新鲜酵母浸出液 30～50 ml，

（8）质量浓度为3%的L-谷氨酰胺16～17 ml，

（9）质量浓度为10%的L-半胱氨酸4.0～6.0 ml，

（10）质量浓度为15%的水解乳蛋白 32.0～35.0 ml，

（11）10 mg/ml的转铁蛋白 0.8～1.5ml，

（12）10 mg/ml的胰岛素 0.8～1.5 ml，

（13）2mg/ml的小牛胸腺DNA 8.0～10.0 ml，

（14）20万IU/ml的青霉素 0.25 ml，

（15）无菌马血清50 ml。

2.根据权利要求1所述的一种绵羊肺炎支原体低血清高效培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）基础培养基的制备：

取权利要求1所述的基础培养基组分中的（1）-（5）逐一加入300ml去离子水（6）中，充分混合，115℃高压灭菌20min后冷却至室温备用；

2）辅助培养基的制备：

取经0.22 微米滤膜滤过除菌的权利要求1所述的（7）-（15）成分，充分混合，即得辅助培养基；

3）混合定容：

无菌条件下，将步骤1）得到的基础培养基和步骤2）得到的辅助培养基混合，用灭菌水补齐定容至1000ml，用灭菌的1M NaOH调pH值到7.2-7.4，充分摇匀，分装后置4℃保存备用。

3.根据权利要求1所述的一种绵羊肺炎支原体低血清高效培养基在培养绵羊肺炎支原体中的应用。

4.根据权利要求1所述的一种绵羊肺炎支原体低血清高效培养基在制备绵羊肺炎支原体疫苗抗原中的应用。