[发明专利]一种脂质体纳米颗粒及其药物组合物和应用

说明书

本发明提供一种脂质体纳米颗粒，所述脂质体纳米颗粒为由脂质体囊泡包裹的纳米颗粒，所述脂质体囊泡的表面修饰有二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇，所述纳米颗粒由脂粒、硫酸软骨素和鱼精蛋白组成，所述脂质体囊泡由二油酰磷脂酰乙醇胺、2,3‑二油氧基丙基三甲基氯化铵和胆固醇组成。本发明还提供了所述脂质体纳米颗粒的制备方法及其包括所述脂质体纳米颗粒的一种药物组合物。本发明提供的脂质体纳米颗粒作为载体具有较高的转染效果，本发明提供的药物组合物对于多种肿瘤具有较好的治疗效果。

技术领域

本发明属于医药技术领域。具体而言，本发明提供了一种脂质体纳米颗粒及其药物组合物和应用。

背景技术

目前，在多种肿瘤的基因治疗中，常用载体主要有病毒载体和非病毒载体。虽然病毒载体展现了优秀的基因转染效率,但是它们可能引发突变和其它致癌作用。再者，病毒载体的重复使用可能诱发免疫缺失。而常用的非病毒载体包括聚合物，纳米颗粒(磁性纳米粒子、金纳米颗粒、具有不同表面修饰的碳纳米颗粒)和商业试剂(Lipofectamine2000,Lipofectamine3000)等，转染效率较低，不能对癌症起到很好的基因治疗效果。

CRISPR/Cas9系统是一个多功能的基因编辑平台，在治疗具有挑战性的疾病(如癌症)时有潜在的优势。但由于常用的Cas9蛋白尺寸较大，目前的常用载体很难对其进行高效的递送，限制了其在基础研究和治疗的应用。

因此，寻找一种合适的载体将治疗肿瘤的药物(如CRISPR/Cas9系统)高效地递送到肿瘤病灶，就显得尤为重要。

发明内容

因此，基于上述已有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种脂质体纳米颗粒及其药物组合物和应用。

针对上述发明目的，本发明是通过下述技术方案实现的：

本发明提供一种脂质体纳米颗粒(PLNP)，其中，所述脂质体纳米颗粒为由脂质体囊泡包裹的纳米颗粒，所述脂质体囊泡的表面修饰有二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇(DSPE-PEG)，所述纳米颗粒由脂粒、硫酸软骨素和鱼精蛋白组成，所述脂质体囊泡由二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、2,3-二油氧基丙基三甲基氯化铵(DOTAP)和胆固醇组成。优选地，根据前述的脂质体纳米颗粒，其中，所述纳米颗粒中的脂粒、硫酸软骨素和鱼精蛋白摩尔比为0.1～5：0.1～8：0.1～10。优选为0.2～4：0.2～5：0.1～6。

更优选地，根据前述的脂质体纳米颗粒，其中，所述脂质体囊泡中的二油酰磷脂酰乙醇胺、2,3-二油氧基丙基三甲基氯化铵和胆固醇摩尔比为0.5～100：0.5～100：0.5～100。优选为1～100：1～100：1～100。更优选为1～20：1～20：1～20。

本发明还提供一种前述的脂质体纳米颗粒的制备方法，其中，所述方法包括：(1)按照配比，将脂粒与硫酸软骨素混合后静止获得第一混合液，(2)按照配比，将步骤(1)获得的第一混合液与鱼精蛋白混合后静止获得第二混合液，(3)按照配比，将步骤(2)获得的第二混合液与脂质体囊泡混合后静止获得第三混合液，(4)按照配比，将步骤(3)获得的第三混合液与DSPE-PEG混合获得所述脂质体纳米颗粒。优选地，步骤(1)、(2)、(3)的静止时间和/或(4)的混合时间为15-30分钟。其中，步骤(1)中脂粒与硫酸软骨素可在水、PBS或葡萄糖溶液中进行混合。步骤(4)中所述混合温度可为55℃。

优选地，根据前述的制备方法，其中，步骤(3)中的所述脂质体囊泡的制备方法包括：(a)按照配比，将二油酰磷脂酰乙醇胺、2,3-二油氧基丙基三甲基氯化铵和胆固醇溶于氯仿与甲醇的混合液中；(b)旋转蒸发步骤(a)获得的所述混合液至只剩磷脂膜；(c)在步骤(b)获得的所述磷脂膜中加入水、PBS或葡萄糖；(d)超声至形成所述脂质体囊泡。优选地，步骤(b)中的旋转蒸发温度为30-35℃。

前述的脂质体纳米颗粒的制备方法具体可如图1所示。