[发明专利]一种利用尿素抑制铁蛋白-多酚复合物聚沉的方法

说明书

本发明公开了一种利用低浓度尿素抑制铁蛋白‑多酚复合物聚沉的方法，包括以下步骤：将铁蛋白溶液置于离心管中，取天然多酚类物质，溶于蒸馏水；将多酚溶液和铁蛋白溶液混合，室温避光搅拌，随后在上述溶液中加入低尿素溶液，搅拌，静置，于4℃层析柜中避光透析去除尿素即得最终产品。最终产品是一种利用尿素抑制铁蛋白‑多酚复合物聚沉的方法，既提高了铁蛋白和多酚类物质的推广应用，也为制备均匀的其他食品营养素的复合物提供了一种新方法和思路，具有很高的实际应用和推广价值。

技术领域

一种利用尿素抑制铁蛋白-多酚复合物聚沉的方法，属于食品领域技术。

背景技术

酚类化合物是植物体内一类最重要的次生代谢产物，具有较强的抗氧化作用以及明显的抑菌、抗癌、抗衰老和抑制胆固醇升高等功效。摄取一定量的植物多酚能够有效地预防和抑制疾病的发生，且随着现代分离提取技术的迅猛发展，大量植物多酚已从植物中分离鉴定出来。人体摄入的多种食物组分，如蛋白、碳水化合物、脂类，往往对多酚的吸收产生明显的影响。科学研究表明，多元酚结构具有独特的理化性质，如能与蛋白质、多糖、生物碱等结合，能与金属离子络合，具有还原性，能清除羟自由基等。在食品加工及人体消化过程中，多酚能与多种化合物发生相互作用，其中蛋白质是最主要的化合物，在食品中通过与蛋白的相互作用可以改善食品的功能特性，在食品领域具有很好的应用前景。多酚对于蛋白质都有结合能力，但是仍然具有选择性，体现在不同的多酚对于不同的蛋白质的亲和力差异上。对多酚亲和性高的蛋白质特征为：分子量较大，结构开放松散，脯氨酸或其它疏水性氨基酸含量较高。铁蛋白作为一种自然界广泛存在的天然蛋白，具有开发新型矿质元素营养强化剂的潜力。铁蛋白广泛存在于动物、植物和细菌体内，由于其具有储存铁元素及调节体内铁平衡的功能，铁蛋白能够使机体内的铁保持可溶、无毒且生物可利用的形式。

赋予多酚以高生物活性的主要分子基团-多酚羟基对强酸、强碱、光、热、氧等环境条件敏感，易发生氧化、聚合、缩合等反应，从而导致稳定性的降低和生物活性的下降。铁蛋白作为一种水溶性蛋白质，其表面具有多种亲水性氨基酸，这些亲水区域为多酚的结合提供了场所。另外，随着多酚-蛋白体系中多酚浓度的增加，容易引起多酚-蛋白复合物的结构变化，例如聚合程度的增加，进而导致多酚-蛋白复合物沉淀的形成。在食品工业中，多酚和蛋白质作为常见的食品营养物质，其相互作用更容易引起蛋白质的聚沉，大大限制了多酚和蛋白质这一营养强化剂的推广应用。

一般来说，非极性溶剂能够防止多酚-蛋白质沉淀等混浊的形成。尿素是常用的化学变性剂，在蛋白质变性中有广泛的应用。尿素的加入会使铁蛋白-多酚复合物的聚合沉淀物溶解，且随着尿素浓度增加，浊度下降.这是因为尿素是氢键的阻断剂，破坏多酚与铁蛋白间氢键连接，使聚合物溶解。

以铁蛋白、多酚类物质为原料，通过添加低浓度尿素的方式抑制复合物的聚沉制备出均匀分散的铁蛋白-多酚复合物这种方法的应用在国内外未见公开报道，在国内外未见公开使用。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种利用尿素抑制铁蛋白-多酚复合物聚沉的方法，以铁蛋白和多酚物质为原料，制备出铁蛋白-多酚复合物，并通过添加尿素的方式来抑制铁蛋白-多酚复合物的聚沉，最终产品是一种利用尿素抑制铁蛋白-多酚复合物聚沉的方法，为推广多酚在食品中的应用以及为蛋白质等其他食品营养素的功能特性的提高提供新的思路和方法。

本发明提供了一种新型的抑制铁蛋白-多酚复合物的方法，包括以下步骤：将铁蛋白溶液置于离心管中，取天然多酚类物质，溶于蒸馏水；将多酚类溶液和铁蛋白溶液混合，室温避光搅拌，之后添加尿素溶液，室温避光搅拌，将上述溶液于4℃层析柜中避光透析即得均匀的铁蛋白-多酚复合物溶液。

进一步的，所述铁蛋白溶液的浓度为1.0μM，其pH值为6.8左右。

进一步的，称取多酚类物质溶解在蒸馏水中制备成浓度为8mM的母液。

进一步的，铁蛋白和多酚类溶液混合时的摩尔浓度比为1∶200。