[发明专利]一种基于细胞穿膜肽Tat(49-57)的抗菌肽及其合成方法

权利要求书

1.一种基于细胞穿膜肽Tat(49-57)的抗菌肽，其特征在于：该抗菌肽为Tat(YY)或Tat(FF)， Tat(YY)、Tat(FF)的肽链序列依次如SEQ ID No.3、SEQ ID No.5所示。

2.一种合成如权利要求1所述抗菌肽的方法，其特征在于：以Wang树脂为载体，Fmoc为氨基酸侧链保护基，哌啶的DMF溶液为脱保护试剂，HBTU、HOBT、DIEA为氨基酸缩合剂，根据目标抗菌肽的序列，从C-端到N-端将相应的氨基酸进行缩合偶联；所有的氨基酸均偶联结束后，将最后一个氨基酸的Fmoc保护基脱除掉，洗涤，吹干；然后加入由三氟乙酸、苯甲硫醚、乙二硫醇、水和苯酚配制而成的切割试剂，切割后，过滤，收集滤液于冰乙醚中，置于冰箱中静止直至有沉淀出现，离心，弃去上清液，再重复加入冰乙醚--离心数次，最后一次将上清液弃掉，剩下的沉淀经干燥，所得固体粉末进一步用二次蒸馏水溶解后，送去RP-HPLC分离纯化，收集主峰流出液，并冷冻干燥后获得相应的目标抗菌肽。

3.如权利要求2所述抗菌肽的合成方法，其特征在于各目标抗菌肽的RP-HPLC分离纯化条件如下：

Tat(YY)的RP-HPLC分离条件：液相色谱柱：Agilent Zorbax 300SB-C18；柱温：25 ℃；检测波长：220 nm；流速：1.0 mL/min；流动相：A相 0.1% TFA的水、B相 0.1% TFA的乙腈；流动相梯度：21%~41%B相/0~20min；

Tat(FF)的RP-HPLC分离条件：液相色谱柱：Agilent Zorbax 300SB-C18；柱温：25 ℃；检测波长：220 nm；流速：1.0 mL/min；流动相：A相：0.1% TFA的水、B相：0.1% TFA的乙腈；流动相梯度：32%~52%B相/0~20min。