[发明专利]一种GPR120小分子荧光探针及其应用

权利要求书

1.一种GPR120的小分子荧光探针，其特征是，具有下述结构通式(Ⅰ)：

式中，所述R为香豆素类、萘二酰亚胺类荧光团；n＝1-6。

2.如权利要求1所述的小分子荧光探针，其特征是：所述n＝1-5。

3.如权利要求1所述的小分子荧光探针，其特征是,具有下述结构通式：

其中，n＝1-5。

4.如权利要求1所述的小分子荧光探针，其特征是：n＝1,2,3,5；R为含羧基的香豆素；或者，n＝1,2,4；R为萘二酰亚胺类荧光团。

5.如权利要求1所述的小分子荧光探针，其特征是，所述小分子荧光探针具有如下结构式的化合物：

6.权利要求1～5中任一项所述的小分子荧光探针的制备方法，其特征是，包括以下步骤：

(1)药效基团的制备：首先由对羟基苯丙酸和甲醇反应制备得到中间体1，然后将由中间体1与4-硝基卤苄反应制备得到中间体2，在将中间体2中的硝基还原为氨基得到中间体3，即得到药效基团；其中，所述中间体1的结构式如1所示，中间体2的结构式如2所示，中间体3的结构式如3所示：

(2)连接基团连接荧光基团得到中间体5，所述连接基团的结构式如(Ⅳ)所示，所述中间体5的结构式如5所示，其中，n＝0～5，R为各种荧光团：

(3)荧光探针的制备：将所述中间体3与所述中间体5进行酰胺化反应制备得到中间体6，然后中间体6中的酯基水解为羧基，得到荧光探针，如(Ⅰ)所示；其中，所述中间体6的结构式如6所示，其中，n＝0～5，R为各种荧光团：

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征是：步骤(1)中，所述4-硝基卤苄为4-硝基氯苄、4-硝基溴苄或4-硝基碘苄。

8.如权利要求6所述的制备方法，其特征是：所述中间体1的具体制备方法为：对羟基苯丙酸和无水甲醇搅拌溶解后加入催化量的浓硫酸，在55～65℃下搅拌反应5～7h，得到含有中间体1的反应液。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征是：中间体1的纯化方法为：向含有中间体1的反应液中加入水和二氯甲烷萃取，合并有机层，饱和食盐水洗，无水MgSO₄干燥过夜，过滤、浓缩、柱层析纯化，得无色透明油状物，即为中间体1。

10.如权利要求6所述的制备方法，其特征是：所述中间体2的具体制备方法为：将中间体1溶于乙腈中，加入碳酸铯和4-硝基卤苄，室温反应3～5h，得到含有中间体2的反应液。

11.如权利要求10所述的制备方法，其特征是：中间体2的纯化方法为：向含有中间体2的反应液中加入水和二氯甲烷萃取，合并有机层，饱和食盐水洗，无水MgSO₄干燥过夜，过滤、浓缩、柱层析纯化，得白色固体，即为中间体2。

12.如权利要求6所述的制备方法，其特征是：所述中间体3的具体制备方法为：将中间体2溶于甲醇中，加入饱和氯化铵溶液和锌粉，室温反应0.5～1.5h，得到含有中间体3的反应液。

13.如权利要求12所述的制备方法，其特征是：中间体3的纯化方法为：将所述含有中间体3的反应液用硅藻土过滤，甲醇洗涤，浓缩大部分滤液，加入水和二氯甲烷萃取，合并有机层，饱和食盐水洗，无水MgSO₄干燥，过滤、浓缩，得白色固体，即为中间体3。