[发明专利]一种猪H1N1亚型流感病毒血凝素重组蛋白的制备方法及该病毒抗体的液相芯片检测试剂盒有效
| 申请号： | 201611015852.3 | 申请日： | 2016-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN106749553B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 张桂红;王衡;记方晓;孙彦阔;冀池海;曾梦 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/11 | 分类号： | C07K14/11;C12N15/70;G01N33/569;G01N33/543;C09K11/06;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 h1n1 流感病毒 血凝素 重组 蛋白 制备 方法 病毒 抗体 芯片 检测 试剂盒 | ||
1.一种猪流感病毒的血凝素重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1. 去除表达HA基因的信号肽的基因序列，利用HA-F和HA-R引物扩增HA基因；
其中，HA-F和HA-R引物的序列如 SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；
S2. 连接 pMAL-c5X载体，获得pMAL-cHA重组质粒，转入大肠杆菌诱导表达即可；
其中，S2所述诱导表达的条件为：IPTG 0.3mM，温度37℃，时间2小时。
2.权利要求1所述方法获得的猪流感病毒的血凝素重组蛋白。
3.权利要求2所述猪流感病毒的血凝素重组蛋白作为免疫原在制备检测猪流感
病毒的试剂中的应用。
4.一种检测猪流感病毒的羧基化荧光微球46-HA，其特征在于，是将权利要求2
所述猪流感病毒的血凝素重组蛋白与羧基化荧光微球046偶联获得。
5.权利要求4所述的检测猪流感病毒的羧基化荧光微球46-HA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1. 羧基化荧光微球的活化：将清洗后的羧基化荧光微球046分别依次重悬于磷酸氢二钠缓冲液、Sulfo-NHS溶液和EDC溶液中进行活化；
S2. 活化后的羧基化荧光微球046悬液中加入猪流感病毒的血凝素重组蛋白进行孵育，并用PBS-TBN重悬即得。
6.一种检测猪流感病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求2所
述的猪流感病毒的血凝素重组蛋白。
7.根据权利要求6所述的检测猪流感病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒
含有权利要求4所述的羧基化荧光微球46-HA。
8.根据权利要求7所述的检测猪流感病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒
还含有生物标记的鸡抗鼠IgG抗体或者兔抗猪IgG抗体、链霉素-藻红蛋白。
9.根据权利要求8所述的检测猪流感病毒的试剂盒，其特征在于，所述生物标
记的鸡抗鼠IgG抗体的稀释度为1：1000，兔抗猪IgG抗体的稀释度为1：5000，链霉素-藻红蛋白的稀释度为1：1000。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华南农业大学，未经华南农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201611015852.3/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：三维结构物的制造方法及其制造装置
- 下一篇：电脑汉英互读互译键盘最佳键位
