[发明专利]一种嘉兰百合快速繁殖的方法

权利要求书

1.一种嘉兰百合快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

A、外植体的选择与灭菌：选取生长健壮且未形成花芽的茎尖和/或腋芽为外植体，剥去外层叶片，切成长为1.5~2.0cm的小段，清洗干净并消毒，然后用无菌水漂洗至无消毒剂残留；

B、不定芽诱导培养：将经过A步骤消毒灭菌后的小段接种于不定芽诱导培养基中，在培养温度为27±2℃，光照强度为2000～3000lx，日光照时间为10～12h/d的条件下，诱导培养20~40d直至外植体萌发分化出0.5~1.5cm长的不定芽；

所述的不定芽诱导培养基为：MS培养基+6.0mg/L~8.0mg/L 6-苄氨基嘌呤+0.01mg/L~0.05mg/L萘乙酸+6.5g/L~7.0g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH5.8~6.0；

C、不定芽继代增殖培养：将B步骤的不定芽在无菌条件下切下置于增殖培养基中，在培养温度为27±2℃，光照强度为2000～3000lx，日光照时间为10～12h/d的条件下进行继代培养，获得带有茎盘的不定芽；

所述的增殖培养基MS培养基+4.0mg/L~5.0mg/L 6-苄氨基嘌呤+0.05mg/L~0.1mg/L萘乙酸+琼脂6.5g/L~7.0g/L+蔗糖30g/L，pH5.8~6.0；

D、块茎培养：将C步骤获得的带有茎盘的不定芽在无菌条件下切成不定芽和茎盘两部分，切下的不定芽返回接种至C步骤的增殖培养基中，再次进行继代培养；而切下的茎盘去除根、茎、叶后，将其分割成2~4块接种至块茎培养基中，在培养温度为27±2℃，光照强度为2000～3000lx，日光照时间为10～12h/d的条件下进行块茎培养50~60d，待块茎长至直径1.0~1.5cm即可出瓶下地种植；

所述的块茎培养基为：MS培养基+1.0mg/L~1.5mg/L 6-苄氨基嘌呤+0.1mg/L~0.5mg/L萘乙酸+6.5g/L~7.0g/L琼脂+60g/L蔗糖，pH5.8~6.0；

E、移栽：将D步骤出瓶的块茎按常规洗净块茎上的培养基，放入质量浓度为0.1～0.2%的多菌灵溶液中消毒1～2min后，移栽至质量比为红土：腐叶土=1︰1的营养基质中，需40%~45%的遮阴度，按常规进行浇水、施肥管理，生长40~60d后发芽出苗，即可得到嘉兰百合种苗。

2.根据权利要求1所述的嘉兰百合快速繁殖的方法，其特征在于，步骤A中所述的清洗和消毒的具体方法是用常规的加有洗涤剂的水清洗后，在质量浓度为0.1%的升汞溶液中消毒7~10min，再在质量浓度为0.3%的次氯酸钠溶液中消毒3~5min，然后用无菌水漂洗3~4次。

3.根据权利要求1所述的嘉兰百合快速繁殖的方法，其特征在于，所述的继代周期为20~30d，继代3~5代，可获得大量带有茎盘的不定芽。

4.根据权利要求1所述的嘉兰百合快速繁殖的方法，其特征在于，步骤D中，切下的茎盘去除根、茎、叶后，将其分割成2~4块，每块粒径为0.3~0.5cm。