[发明专利]一种从蓝靛果中快速高效提取纯化花色苷的方法有效
申请号: | 201610986415.X | 申请日: | 2016-11-10 |
公开(公告)号: | CN107325139B | 公开(公告)日: | 2021-03-30 |
发明(设计)人: | 付玉杰;焦骄;李璐;盖庆岩;王微;王鹏;王希清 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学 |
主分类号: | C07H17/065 | 分类号: | C07H17/065;C07H1/08 |
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地址: | 150040 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蓝靛 快速 高效 提取 纯化 花色 方法 | ||
1.一种从蓝靛果中快速高效提取纯化花色苷的方法,其特征在于按如下工艺步骤进行:
A.高速匀质破碎酶解蓝靛果原料:新鲜的蓝靛果按质量体积比加入3~8倍原料质量的水进行高速匀质破碎5~10min,用柠檬酸、冰醋酸调节浆液pH为3.5~5.5,加入纤维素酶、果胶酶或两者组成的复合酶使酶浓度为300~700U/mL,然后在35~50℃条件下酶解2~5h,过滤,收集滤液、滤渣;
B.负压空化强化提取蓝靛果滤渣:上述滤渣按质量体积比加入10~20倍滤渣质量的乙醇或醇水混合溶液进行负压空化强化提取,提取温度为25~40℃,提取压力为-0.04~-0.08MPa,提取2~4次,每次30~60min,合并提取液与步骤A所得滤液,减压除去2/3溶液;
C.低温絮凝沉降蓝靛果浓缩滤液:上述浓缩滤液中加入50%~70%的乙醇配置饱和溶液后搅拌均匀,置于0~8℃下放置24~48h,分离得到上清液和沉淀,再将沉淀在35~50℃下减压干燥,得富集物;
D.中压快闪反相柱层析分离矢车菊素-3-O-葡萄糖苷:上述低温絮凝沉降富集物加入20%甲醇至刚好溶解后进行中压快闪反相色谱柱层析,其中柱填料为ODS-C18反相硅胶:上样体积为柱体积的1/12~1/5;等度洗脱选用的洗脱剂为20%甲醇,洗脱流速为20~35mL/min,然后在检测波长520nm下进行HPLC的检测,合并相同流份,减压浓缩至干,得到矢车菊素-3-O-葡萄糖苷单体;
E.矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的结晶:矢车菊素-3-O-葡萄糖苷单体用50%~70%的乙醇反复重结晶得到纯度可达95%的矢车菊素-3-O-葡萄糖苷。
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