[发明专利]一种象鼻虫变应原

说明书

本发明提供了一种象鼻虫变应原，属于生物技术药物领域，具体指米象(Sitophilus oryzae)变应原制备方法。米象变应原按以下制备方法制成：米象种子收集、接种培养、收集纯化、脱脂、真空干燥即为米象变应原原材料，原材料按照1∶10～20比例加提取液提取，离心、过滤、超滤浓缩、真空冷冻干燥，即为米象变应原。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种象鼻虫变应原的制备方法。

背景技术

变态反应性疾病又称过敏性疾病，是因为病人敏感性过高，在血液中产生一种对某种特殊的过敏原过敏的特异性免疫球蛋白E抗体(IgE)。常见的过敏性疾病有：哮喘、鼻炎、过敏性湿疹、结膜炎、食物过敏、药物过敏和过敏性休克等。据世界变态反应组织报告，全世界有30％～40％的人口被过敏问题困扰。全球约有3亿人患有哮喘，其中50％以上的成人和至少80％的儿童患者均由过敏因素诱发。世界卫生组织已将变态反应性疾病同心脑血管疾病、肥胖、肿瘤一起列为21世纪重点防治的疾病之一。

近年来，过敏性疾病的发病率逐年在增加。伴随着过敏人群的增加，引起过敏的种类多种多样。对于谷物过敏的几率随着现代医学的发展，发病率越来越高。而米象作为危害谷物的主要害虫，其致敏程度也越来越受到关注。米象存在于稻米等谷物中，当过敏性病人接触到米象的体表皮屑、粪便和分泌物或被米象污染的食物时，会引发其过敏。但由于缺少米象变应原则无法对米象过敏病人进行诊断和治疗，对于米象变应原的制备迫在眉睫。

发明内容：

本发明要解决的问题是提供一种象鼻虫变应原的制备方法。

本发明中象鼻虫变应原的象鼻虫是指米象，主要寄主于稻米、玉米、高粱等谷物中。成虫啮食谷粒，幼虫蛀食谷粒内部。成虫体长2.4～2.9mm，宽0.9～1.5mm，体卵圆形，红褐至沥青色，背无光泽或略具光泽。头部刻点较明显，额前端扁平，喙基部较粗。触角着生于基部1/3～1/4处，顶端圆形。前胸长宽约相等，基部宽，向前缩窄，背面密布圆形刻点。小盾片心形，有宽纵沟。鞘翅肩明显，两侧平行；行纹略宽于行间，行纹刻点上各具1根直立鳞毛；每鞘翅基部和翅坡各有1椭圆形黄褐至红褐色斑。腿节棒状：胫节刻点与毛排列成纵列，端部有钩。雄虫阳茎背面无纵沟，雌虫“丫”形骨片两臂钝圆。

本发明一方面提供了米象变应原原材料的制备方法。

米象变应原原材料通过种子收集、培养、纯化、干燥等制备步骤。

1)米象种子的收集：在米象容易滋生的稻米、玉米等谷物囤积地收集米象种子；

种子鉴定：解剖镜下观察米象成虫的形态。

2)米象培养基的筛选：稻米使用浓度为5％～25％(质量体积比)的氯化钠溶液进行浮选，弃去漂浮于液体表面的稻米，将沉于底部的稻米用清水洗净，晾干，放入培养桶内，作为繁殖米象的培养基。

3)接种培养：将收集到的米象种子接种于放有米象培养基的培养桶内，环境温度25～30℃，相对湿度65％～80％，避光培养2～4月。

4)收集：将含有米象与培养基混合物的培养桶置于-20℃的冰箱内冷冻48小时以上。

5)纯化：将冷冻后米象与培养基混合物过20目筛，取筛下部分，再过60目筛，米象含量90％以上为合格。

6)清洗：将纯化后的米象置于广口瓶中，加入丙酮浸没米象，浸泡60～120分钟后弃掉上层溶液。

7)真空干燥：将米象置于滤纸上摊开，放入真空干燥箱内，干燥48小时以上。

8)粉碎：将干燥后的米象置于粉碎机内粉碎，过120目筛，取其筛下部分，过筛率达到90％以上。

9)脱脂：按质量体积比为1∶2～6(W/V)的比例加入丙酮进行脱脂，震荡30min后静置5min，观察上层液体颜色，重复操作直至上清液无色为止。