[发明专利]一种象鼻虫变应原

权利要求书

1.一种象鼻虫变应原，具体指米象变应原。

2.根据权利要求1所述米象变应原，其特征在于：米象变应原原材料，通过种子收集、接种培养、纯化清洗、脱脂、真空干燥，制备成原材料。

3.根据权利要求1所述米象变应原，米象变应原原材料通过提取、离心、过滤、真空冷冻干燥，制备成米象变应原。

4.根据权利要求2所述，米象变应原材料的制备方法，采用下述步骤制备：

1)米象种子的收集：在米象容易滋生的稻米、玉米等谷物囤积地收集米象种子；

2)米象培养基的筛选：稻米使用浓度为5％～25％(质量体积比)的氯化钠溶液进行浮选，弃去漂浮于液体表面的稻米，将沉于底部的稻米用清水洗净，晾干，放入培养桶内，作为繁殖米象的培养基；

3)接种培养：将收集到的米象种子接种于放有米象培养基的培养桶内，环境温度25～30℃，相对湿度65％～80％，避光培养2～4月；

4)收集：将含有米象与培养基混合物的培养桶置于-20℃的冰箱内冷冻48小时以上；

5)纯化：将冷冻后米象与培养基混合物过20目筛，取筛下部分，再过60目筛，米象含量90％以上为合格；

6)清洗：将纯化后的米象置于广口瓶中，加入丙酮浸没米象，浸泡60～120分钟后弃掉上层溶液；

7)真空干燥：将米象置于滤纸上摊开，放入真空干燥箱内，干燥48小时以上；

8)粉碎：将干燥后的米象置于粉碎机内粉碎，过120目筛，取其筛下部分，过筛率达到90％以上；

9)脱脂：按质量体积比为1∶2～6(W/V)的比例加入丙酮进行脱脂，震荡30min后静置5min，观察上层液体颜色，重复操作直至上清液无色为止；

10)真空干燥：弃去上层液体，将固体，放于真空干燥箱内干燥48小时以上；

11)保存：-20℃密封避光保存。

5.根据权利要求3所述，米象变应原制备方法，采用下述步骤制备：

1)提取：米象变应原原材料与50mM磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液按1～2∶20(W/V)的比例混合，2～8℃，搅拌提取24小时；

2)离心：于4℃，8000rmp离心15～30分钟；

3)过滤：过滤上清液滤纸过滤，0.22μm膜除菌过滤；

4)浓缩：用截留分子量5kD的膜，以pH8的50mM磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液衡滤，至滤出液无色为止，超滤浓缩至体积为原体积的三分之一，收集回流液，经0.22μm膜过滤除菌得米象变应原原液；

5)真空冷冻干燥：用甘露醇水溶液稀释到规定浓度，甘露醇终浓度为2％；稀配后的米象变应原原液经0.22μm膜过滤除菌后分装到西林瓶中，每瓶1ml；真空冷冻干燥48h以上，即得米象变应原；

6)保存：-20℃密封避光保存。