[发明专利]一种测定乳制品中三氮脒含量的方法

说明书

本发明提供了一种测定三氮脒含量的方法，其特征在于：采用有机溶剂固相萃取待测物中的三氮脒，采用液相色谱质谱联用法测定其含量。本发明提供的酸化乙腈振荡提取固相萃取柱净化的前处理方法具有快速，选择性强，污染小，检测限低的特点。本发明可以实现牛奶和奶粉中三氮脒含量的测定。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体地，涉及一种测定三氮脒含量的方法，更具体地，涉及一种乳制品(特别是牛奶)中三氮脒含量的测定方法。

背景技术

三氮脒是目前比较常用的新型抗血液原虫药，主要使用对象为泌乳期的奶牛，不合理的使用会造成生鲜乳中兽药残留，存在一定的安全风险。

目前国内没有该兽药对应的检测方法，国内外的文献中鲜有报道。但是国内外知名乳品企业已经开始在生鲜乳中检测该参数，以作为生鲜乳中风险监测的常规指标，故建立该参数的检测方法就非常迫切。

发明内容

针对上述缺陷，本发明提供的方法解决了测定待测物(特别是，乳制品)中三氮脒的问题。实现了分析待测物(特别是针对乳制品这类物质)中，是否存在有三氮脒的检测。本发明提供的酸化乙腈振荡萃取的方法快速，回收率高，对仪器不造成污染，并有效的降低了检出限。

本发明提供了一种测定三氮脒含量的方法，其特征在于：采用酸化乙腈振荡萃取待测物中的三氮脒，采用液相色谱质谱联用法测定其含量。

进一步地，本发明提供的一种测定三氮脒含量的方法，还具有如下特点：即、具体检测步骤如下所示：

步骤一、于待测物中加入酸化乙腈溶液，均质，提取0.5-5分钟后，离心2-20分钟；

酸化乙腈可以为甲酸乙腈、乙酸乙腈、丙酸乙腈等各类酸化乙腈溶液。

优选提取0.5-1.5分钟，离心3-6分钟。在步骤一中，该均质、和/或提取、和/或离心的过程可以为一次或多次，优选为2-3次。

在本发明的具体操作过程中，采用酸化的乙腈可以很好地沉淀乳制品的蛋白质，其分离效果极好。

步骤二、取上清液加载到固相萃取柱中，依次采用至少一次的碱液、至少一次的醇溶液、至少一次的酸化醇溶液洗脱，收集全部洗脱液；

固相萃取柱可以选自弱阳离子交换柱，当采用弱阳离子交换柱时，需用酸性溶液洗脱待测物品。在本发明的具体操作过程中发现，选用酸性溶液洗脱待测物较其他溶剂洗脱效果好。

该上清液的取用量为总量的50-90％。

该碱液、醇溶液和酸化醇溶液的用量为上清液的0.5-5倍。

该碱液、醇溶液和酸化醇溶液的体积比为1:0.8-1.5:0.8-1.5。

步骤三、洗脱液在30-60℃的温度下，经由保护气干燥浓缩(如：氮气等保护气吹干等方式)，用酸和乙腈的混合水溶液定容；

酸和乙腈的混合水溶液用量，按检测的需要进行配置，或按浓度比例进行配置。

步骤四、过滤后，采用液相色谱质谱联用法对其进行定量分析；

该过滤方式可以为膜过滤、以石英砂、硅胶、海藻砂、滤纸等为介质的过滤。

其中，上述步骤一的过程为至少一次。

进一步地，本发明提供的一种测定三氮脒含量的方法，还具有如下特点：即、上述酸化乙腈为0.8-1.5％的甲酸乙腈溶液。

即、由X ml的甲酸，溶解于(100-X)ml的乙腈中后，定容到100，即获得X％的甲酸乙腈溶液。

进一步地，本发明提供的一种测定三氮脒含量的方法，还具有如下特点：即、在步骤一中，上述提取的方式优选为涡旋震荡提取法；