[发明专利]一种定量测定培养液中油的方法

说明书

本发明涉及一种定量测定培养液中油的方法，所述方法包括：针对水体系样液，利用低场核磁共振仪测定，以面积质量比计算发酵液中油含量。本发明的方法得到的结果比传统的检测方法更方便准确，是一种新的、有效的方法。

技术领域

本发明属于发酵技术领域，更具体地，本发明涉及在发酵工程下游微生物发酵检测中利用低场核磁共振技术定量检测发酵液中油脂的方法。

背景技术

在抗生素发酵工业生产中，以油为碳源时由于不易发生降解物阻遏作用而有利于合成代谢产物，由于表面张力低不易产生气泡而提高了发酵罐的利用率；同时，还有强化氧传递、产物萃取剂、底物增溶剂、代谢激活剂等作用。目前，油在抗生素发酵工业中的作用还是不可替代的。为了提高发酵效率，需要对油进行定量检测，有效控制发酵过程的进行。但是，现在油脂的定量检测方法在指导发酵调控的过程中还有很多不足。索氏提取法等传统的萃取技术虽是经典方法，但是有操作繁琐，过程复杂，费时费力等缺点；尼罗红(Nilered)等染料染色利用分光光度计检测油脂的方法，由于染料本身特性及局限性，具有操作计算复杂、不安全、误差较大等缺点；色谱质谱联用(GC-MS)法等为代表的色谱技术虽然有较高的准确性，但是对样品处理要求很高，检测样品时金钱和时间花费较大；近红外光谱法在油脂常规分析发展中起着重要的作用，但局限性也是多方面的，虽然其灵敏度差、扫描时间长、样品需要专门处理等得到一定的改观，但是在工业生产上还有一定的不足。

低场核磁共振(low-field nuclear magnetic resonance，LF-NMR)一般指恒定磁场强度低于0.5T的核磁共振现象。¹H LF-NMR的基本原理是通过对处于恒定磁场中的样品施加射频脉冲，使氢质子发生共振，质子以非辐射的方式释放所吸收的射频波能量后返回到基态，此过程称为弛豫过程。目前，LF-NMR技术以其快速、无损、样品需要量少且处理简单等特点，在食品科学的检测领域表现出了一定的应用潜力。李潮锐等基于单位质量干燥花生和纯花生油两者的脂肪弛豫谱峰面积之比获得与索氏抽提法相吻合的含油率，Han Zhu等使用低场核磁共振技术检测了猪长肌中的持水量(water holding capacity，WHC)，宋平等通过核磁共振研究水分状态及变化过程和浸种方法对水稻种子吸水量的影响，王乐等通过核磁共振法鉴别食用植物油掺伪餐饮业废油脂，Geir H.等使用低场核磁共振检测肉中脂肪和水含量等。但是，这些研究仅限于低水溶液的短弛豫体系，而高水体系，目前国内外尚未见应用低场核磁共振技术检测的技术。并且，现有技术中，很多低场核磁共振技术的研究只限于定性研究，定量研究更是少之又少。

综上，低场核磁共振技术能准确检测低水体系中油脂含量，但是发酵液属于水体系(多为高水体系)，目前还没有文献报道其定量检测方法。因此，本领域还需要探寻准确检测水体系中油脂含量的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种定量测定培养液中油的方法。

在本发明的第一方面，提供一种定量测定水体系中油含量的方法，所述方法包括：针对水体系样液，利用低场核磁共振仪测定，以面积质量比计算发酵液中油含量；所述的面积质量比是每克油对应的峰面积。

在一个优选例中，所述的定量测定水体系中油含量的方法中，所述的油是植物油；较佳地所述的油包括(但不限于)：大豆油，油菜籽油或棕榈油。

在另一优选例中，所述的定量测定水体系中油含量的方法中，所述的水体系是发酵液。

在另一优选例中，所述的定量测定水体系中油含量的方法中，所述的发酵液是白色链霉菌发酵生产盐霉素的发酵液。

在另一优选例中，所述的定量测定水体系中油含量的方法中，通过将油质量与峰面积做线性拟合，获得油质量。

在另一优选例中，所述的定量测定水体系中油含量的方法中，根据式(I)计算大豆油的质量：

Y＝12956.08927X-71.77