[发明专利]一种血浆纤维蛋白原的检测试剂、其检测方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于临床医学检测技术，具体涉及一种血浆纤维蛋白原的检测试剂、其检测方法及应用。

背景技术

凝血实验对临床各科的疾病诊断具有重要的意义，除了对出血疾病的筛选与诊断外，还用于血栓前状态的检查；弥漫性血管内凝血出血疾病(DIC)的实验诊断以及对各种抗凝治疗者的用药指导和预后估计等。目前临床上常用的检测出凝血机制的试验有凝血四项(含凝血酶原时间PT、活化部分凝血活酶时间APTT、凝血酶时间TT、纤维蛋白原FIB含量)测定。

血栓与止血不仅涉及基础医学，且与多个临床学科(包括血液科呼吸消化科心血管科神经科妇产科普通外科)的疾病密切相关：1)所有手术前检查：外科手术(普外、骨外、妇产、五官、心脏等手术)检查病人的出凝血机能，以免术中发生危险；2)监测抗凝及溶栓治疗：如换瓣手术后、肝素治疗、口服抗凝剂(华发令、香豆素等)减少临床治疗出血发生率；3)血栓前状态监测：心肌梗塞、静脉血栓；4)弥漫性血管内凝血；5)先天及后天性凝血因子缺乏；6)各类肝脏疾病及纤维蛋白原缺乏所致的出血倾向；7)凝血酶原及纤维蛋白原缺乏所致的出血倾向；8)动脉粥样硬化；9)中医活血化淤的诊疗研究。

临床上，1)纤维蛋白原含量增高：纤维蛋白原属急性时相反应物，是心脑血管疾病的重要危险因子，与纤维蛋白原含量呈正向增长关系，无性别差异，有年龄差异，常见于急性炎症、手术后、尿毒症、动脉硬化、放疗后、糖尿病等症状；2)纤维蛋白原含量减低：常见于先天性低(无)FIB血症、肝硬化、原/继发性纤溶、异常FIB血症、重度贫血等。

人体内存在着正常的止血、凝血和抗凝系统，此系统一直保持着动态的生理平衡。若止凝血活性增强或抗凝血活性减弱，便会导致血栓前状态或血栓形成；相反，会引起低凝状态或出血倾向。纤维蛋白即凝血因子I主要由肝脏合成，其参与凝血过程。当纤维蛋白原超过正常范围，即表示凝血功能异常，严重时有出血倾向。

目前，纤维蛋白原的常见检测方法有：1)Class法(凝血酶法)：在被检血浆中加入凝血酶，血浆即凝固，其所需的时间长短与FIB含量的多少呈负相关。被检血浆的FIB实际含量可以从国际标准品FIB参比血浆测定的标准曲线中获得；2)免疫法：免疫火箭电泳法(Laurell法)和酶联免疫法；3)比浊法：血浆被KH₂PO₃-NaOH缓冲液稀释后，加热至56℃，使FIB凝集，比浊测定其含量；4)化学法(双缩脲法)：用Na₂SO₃将血浆中的FIB沉淀分离，然后以双缩脲试剂显色测定；其中以Clauss法最为通用，该法为功能检测，操作简单、结果可靠，故被WHO推荐为测定FIB的参考方法，当凝血仪通过检测PT方法来换算FIB浓度时，如结果可疑，则应用Clauss法复核确定。

CN 101221184A公开了一种用Clauss法检验血浆纤维蛋白原含量的体外诊断试剂盒，该试剂盒包括FIB凝血酶、FIB缓冲液、FIB定值血浆，但所述试剂盒的重复性和稳定性还有待提高。

发明内容

本发明提供一种血浆纤维蛋白原的检测试剂及其检测方法，所述检测方法试剂简单，检测试剂稳定，而且反应体系稳定，影响因素少，且检测精准，操作简单，为临床医学提供了安全、可靠、重复性好的体外诊断试剂。

第一方面，本发明提供了一种血浆纤维蛋白原的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括血浆稀释液R1和凝血酶缓冲体系R2组成；

其中，所述血浆稀释液R1包括咪唑、NaCl和聚乙二醇；

所述凝血酶缓冲体系R2包括咪唑、Triton-X 100、甘露醇、甘氨酸、海藻糖、牛血清蛋白、Proclin-300(硫柳汞)和凝血酶。

本发明中，配制凝血酶缓冲体系R2时，所述Proclin-300最后添加，且逐滴加入并进行搅拌，Proclin-300作为一种粘稠状液体，遇水会结团聚集而沉淀，不容易溶解，所以需边添加边搅拌。