[发明专利]一种具有荧光性质的用于APN抑制剂的化合物及其应用

说明书

本发明公开了一种具有荧光性质的用于APN抑制剂的化合物及其应用，其结构通式为(Ⅰ)或(Ⅱ)。其中：R₁为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、苯甲基、2‑氨基乙基、2,2‑N,N‑二甲基乙基或羟基；R₂为氢、卤素或者亲水性基团，R为甲基或者乙基。所述抑制剂可作为氨肽酶N抑制剂，检测氨肽酶N的组织分布和肿瘤细胞及组织成像，作为抗实体瘤药物，检测氨肽酶N异常表达疾病诊断。

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体涉及一种具有荧光性质的用于APN抑制剂的化合物及其应用。

背景技术

氨肽酶N(APN，CD13)广泛表达于人体正常组织的各个器官,能够从蛋白质的N末端降解释放氨基酸。与正常组织细胞相比，该酶在肿瘤细胞表面过度表达，对肿瘤的侵袭、血管生成具有重要作用。另外，该蛋白酶作为许多病毒的受体参与相应的生理反应。它还表达于抗原递呈细胞表面，通过降解多种免疫活性物质，削弱巨噬细胞和NK细胞(自然杀伤细胞)对肿瘤细胞的识别和杀伤能力[Zhang,X.P.；Xu,W.F.Aminopeptidase N(APN/CD13)asa target for anti-cancer agent design.CurrMed Chem 2008,15,2850-2865]。

上世纪70年代，日本学者Umezawa等人从网状橄榄链霉菌(Streptomycesolivoreticuli)培养液中发现了一种小分子二肽化合物N-[(2S,3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁酰]-L-亮氨酸(Bestatin)，它具有抗菌作用、免疫增强作用和抗肿瘤活性作用[Umezawa,H.；Aoyagi,T.；Suda,H.；Hamada,M.；Takeuchi,T.Bestatin,an inhibitor ofaminopeptidase B,produced by actinomycetes.JAntibiot(Tokyo)1976,29,97-99.]。Bestatin能够抑制多种氨肽酶的活性，如氨肽酶N(APN)、氨肽酶B(APB)、氨肽酶P(APP)、亮氨酸氨肽酶(LAP)、蛋氨酸氨肽酶(MetAP)等。Bestatin于1987年在日本上市，通用名为Ubenimex，商品名为Bestatin。1998年在国内上市，通用名为乌苯美司，商品名为百士欣。自Bestatin被发现以来，药物化学工作者们在APN的抑制剂发现上投入了大量的精力，数以千计的APN抑制剂先后被报道，但是大部分抑制剂(包括Bestatin)的半抑制率IC₅₀均在微摩尔级别。

将抑制剂与荧光团相连接可以得到荧光抑制剂(荧光探针)，通过抑制剂与蛋白的结合可以实现对靶蛋白的荧光标记，从而可以用来进行检测靶点的组织分布。Harbut,M.B.；Velmourougane,G.；Reiss,G.；Chandramohanadas,R.；Greenbaum,D.C.,Developmentof bestatin-based activity-based probes for metallo-aminopeptidases.BioorgMedChem Lett,2008,18,(22),5932-5936；和Hahnenkamp,A.；Schafers,M.；Bremer,C.；Holtke,C.Design and synthesis of small-molecule fluorescent photoprobestargeted to aminopeptdase N(APN/CD13)for optical imagingofangiogenesis.Bioconjug Chem 2013,24,1027-1038，报道了APN靶点的荧光抑制剂，但是已报道的荧光抑制剂的IC₅₀均在微摩尔级别，并且由于上述荧光探针中荧光团影响抑制剂与酶的结合，使得抑制剂与APN活性中心的结合都不强。

发明内容

本发明的目的是克服上述现有技术的不足，提供一种具有荧光性质的用于APN抑制剂的化合物及其应用。

为实现上述技术目的，本发明采用下述技术方案：