[发明专利]一种结肠宁制剂的检测方法

权利要求书

1.一种结肠宁制剂的检测方法，包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

称取异鼠李素对照品，置于容量瓶中，加25～75％乙醇或甲醇，超声溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

结肠宁供试品溶液的制备：取结肠宁样品置于容量瓶中，精密称定，加25～75％甲醇或乙醇，超声30～90min，冷却至室温，定容至刻度，过滤；精密量取续滤液蒸干，加水溶解转移至100ml三角锥形瓶中，加1ml盐酸；置于水浴锅中加热回流30～60min，冷却至室温后以水饱合正丁醇或氯仿或乙酸乙酯萃取；将萃取液蒸干后转移定容至容量瓶中，即得；

(3)HPLC检测：

分别吸取步骤(1)和(2)所得的对照品溶液和结肠宁制剂供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定；

其中，色谱条件为：色谱柱为C₁₈反相色谱柱；紫外检测器；柱温为30～35℃；检测波长为350～370nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.1～1％磷酸溶液，流速为0.8～1.2ml/min；分析时间30分钟；等度洗脱，流动相A:流动相B的体积比＝45～55:55～45。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)对照品溶液的制备按照下述方法进行：

称取异鼠李素对照品5mg，置于容量瓶中，加25～75％乙醇或甲醇，超声溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)供试品溶液的制备按照下述方法进行：

结肠宁供试品溶液的制备：

取结肠宁样品约1～5g置于50ml容量瓶中，精密称定，加30～70％甲醇或乙醇45mL，超声30～90min，冷却至室温，定容至50ml，过滤；精密量取续滤液10～30ml蒸干，加水20ml溶解转移至100ml三角锥形瓶中，加1ml盐酸；置于水浴锅中加热回流30～90min；冷却至室温后以水饱合正丁醇萃取1～5次，每次10～30ml；将萃取液蒸干后转移定容至10ml容量瓶，即得。

4.根据权利要求1-3任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中的色谱柱是柱长为250mm的C₁₈反相色谱柱。

5.根据权利要求1-3任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中检测波长为370nm。

6.根据权利要求1-3任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中流动相B为1％磷酸溶液。

7.根据权利要求1-3任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中流速为1.0ml/min。

8.根据权利要求1-3任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)和(2)中甲醇或乙醇浓度为50％。

9.根据权利要求1-3任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述步骤(3)中流动相A：流动相B的体积比＝53:47。

10.根据权利要求1-3任一权利要求所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中超声处理时间为30分钟，回流时间为60分钟。