[发明专利]一种具有ACE抑制和抗氧化功能的甲鱼蛋白肽及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及水产食品加工技术领域，具体地涉及一种具有ACE抑制和抗氧化功能的甲鱼蛋白肽及其制备方法。

背景技术

高血压是对人类健康危害极大的一种疾病，潜伏期长。高血压的早期阶段，一般没有明显不适症，直至发生临床迹象心脏病发作、脑血管破裂而导致死亡。

血管紧张素转化酶(Angiotensin I converting enzyme，ACE)为肾素-血管紧张素系统的关键酶。血管紧张素原在肾素的作用下转化为血管紧张素I，血管紧张素I在ACE的作用下转化为血管紧张素II，刺激血管收缩，造成血压上升。抑制ACE的活性对降低血压有着积极的作用，因而开发有效的ACE抑制剂引起人们的极大关注。虽然来源于食物的ACE抑制肽比人工合成的ACE抑制剂作用弱，但是它有其独特的优点，不会产生降压过度的问题，安全性高，无副作用，除降压功能外，往往同时具有免疫促进、易消化吸收等功能。由于药物疗法存在副作用，天然食物中的降血压功能因子的开发利用将成为今后高血压非药物治疗的重要部分。

现有技术中关于ACE抑制肽开发的报道，主要是通过酶解的方法从水产动物体或牛乳乳清蛋白源获得ACE抑制肽，酶解过程通常都需要通过添加酸或碱来调节体系的pH值，这无疑影响了获得的ACE抑制肽产品的功能特性，且增加了操作的繁琐程度；还有的ACE抑制肽的制备方法在酶解后还有脱苦脱味的步骤，以改善水产动物的腥味等不适口的味道，这些方法均不同程度地增加了操作步骤和生产成本，制约了产业化规模化ACE抑制肽的生产及蛋白肽的得率。另一方面，现有技术从水生生物中获得的具有ACE抑制功能的肽往往仅具有ACE抑制功能，未发现有其他的生物活性功能，即产品性能单一。

目前国内外专利中未见利用甲鱼肉资源制备血管紧张素转化酶抑制肽的专利文献报道。本发明针对目前甲鱼蛋白产品开发的现状，利用甲鱼肉为原料，通过对甲鱼肉的超声波等预处理，在不添加任何酸和碱条件下，利用多种蛋白酶复合酶解，通过膜分离和凝胶分离技术，开发了同时具有特定降压和抗氧化功能的甲鱼蛋白肽，建立一套简单高效的多功能的甲鱼蛋白肽的制备方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是在于提供一种具有ACE抑制和抗氧化功能的甲鱼蛋白肽。

本发明的另一目的在于提供上述甲鱼蛋白肽的制备方法。

本发明的再一个目的在于提供上述甲鱼蛋白肽的应用。

为了实现上述技术目的，本发明提供了一种具有ACE抑制和抗氧化功能的甲鱼蛋白肽及其制备方法，包括以下步骤:

(1)超声处理去脂的甲鱼肉浆液；

(2)加入复合蛋白酶进行二步法酶解，酶解过程无需添加酸或碱调节pH值；

(3)对酶解液离心并取上清液通过二步超滤法处理；

(4)滤液过柱层析分离，收集洗脱峰，即得。

步骤(1)所述的甲鱼肉浆液通过以下方式获得：新鲜甲鱼放血宰杀，取甲鱼肉，用符合饮用水卫生标准的清洁水清洗,鱼肉清洗后在95℃水中保温5-10分钟，然后在甲鱼肉中加入2.0～4.0倍的水，用打浆机将甲鱼肉打成浆，通过6000～8000g离心10～15min，去上层脂肪，得到去脂的甲鱼鱼肉浆液。

其中，步骤(1)超声处理方法为将去脂的甲鱼肉浆液温度调至55-65℃，25-30kH的超声频率处理15-25min。

本发明通过大量实验发现，甲鱼肉浆液温度调至55-65℃进行超声处理，效果最好，能够较好地改变甲鱼肉蛋白的组织结构，使下面酶解步骤缩短酶解时间和较少的用酶量，就能够获得优质的蛋白肽。

在上述方法的步骤(2)二步法酶解中，第一步酶解加入的复合蛋白酶为碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶，二者质量比为1-2:1，且加入的复合蛋白酶质量为甲鱼肉质量的0.1％-0.3％。

优选地，第一步酶解条件为55-65℃酶解1-2h。

在上述方法的步骤(2)二步法酶解中，第二步酶解加入的复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶，二者质量比为1:1-2，且加入的复合蛋白酶质量为甲鱼肉质量的0.1％-0.3％。

优选地，第二步酶解条件为50-60℃酶解1-2h。

第二步酶解结束之后于90-95℃下保温3-5min，冷却至室温。

上述方法中，步骤(3)的两步超滤法为先用孔径大于5000D的膜超滤，再用孔径为3000D的膜超滤，得到分子量小于3000D的蛋白肽。