[发明专利]一种杀虫蛋白及其核酸、制备方法和应用

权利要求书

1.氨基酸序列如SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 4、SEQ IDNo. 5和SEQ ID No. 7所示的杀虫蛋白中的至少一种在防治有害生物中的应用，其中，

所述有害生物为大猿叶甲（Colaphellus bowringii Baly）、小猿叶甲（Phaedonbrassicae Baly）、黄曲条跳甲（phyllotreta striolata）和榆蓝叶甲（Pyrrhaltaaenescens）中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述杀虫蛋白在活体生物中在16-20°C下表达。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述杀虫蛋白在含有能够翻译为氨基酸序列如SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5和SEQ IDNo. 7所示的杀虫蛋白中的至少一种的核酸的活体生物中表达。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，能够翻译为如SEQ ID No. 1所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 8所示，能够翻译为如SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 9所示，能够翻译为如SEQ ID No. 3所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 10所示，能够翻译为如SEQ ID No. 4所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 11所示，能够翻译为如SEQ ID No. 5所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQID No. 12所示，能够翻译为如SEQ ID No. 7所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ IDNo. 14所示。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述活体生物为微生物。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述活体生物为芽孢杆菌（Bacillus）、假单胞菌（Pseudomonas）、肠杆菌（Escherichia）和酵母（Saccharomyces）中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述活体生物为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）、枯草芽孢杆菌（Bacilllus subtilis）、萎缩芽孢杆菌（Bacillus atrophaeus）和蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）中的至少一种；所述假单胞菌包括荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）；所述肠杆菌包括大肠杆菌（Escherichia coli）。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述微生物为野生微生物和/或遗传工程微生物。

9.根据权利要求2至8中任意一项所述的应用，其特征在于，在所述活体生物中表达所述杀虫蛋白后，还包括从所述活体生物中纯化所述杀虫蛋白的步骤。

10.能够翻译为如氨基酸序列如SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ IDNo. 4、SEQ ID No. 5和SEQ ID No. 7所示的杀虫蛋白中的至少一种的核酸在构建防治有害生物的转基因植物中的应用，其中，

所述应用为在构建防治大猿叶甲（Colaphellus bowringii Baly）、小猿叶甲（Phaedonbrassicae Baly）、黄曲条跳甲（phyllotreta striolata）和榆蓝叶甲（Pyrrhaltaaenescens）中的至少一种的转基因植物中的应用。

11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，能够翻译为如SEQ ID No. 1所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 8所示，能够翻译为如SEQ ID No. 2所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 9所示，能够翻译为如SEQ ID No. 3所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 10所示，能够翻译为如SEQ ID No. 4所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 11所示，能够翻译为如SEQ ID No. 5所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQ ID No. 12所示，能够翻译为如SEQ ID No. 7所示的氨基酸序列的核酸的序列如SEQID No. 14所示。