[发明专利]一种仿生的罗布麻高质统合脱胶方法

权利要求书

1.一种仿生的罗布麻高质统合脱胶方法，其特征在于包括微生物种子菌液获取过程和罗布麻脱胶过程，微生物种子菌液获取过程如下：

1)在梨树果园中取5～10g离地表10cm的土壤，置100ml浓度为0.2～2g/L的磷酸钠盐缓冲液中，在锥形瓶中50～250rpm振荡0.2～2h，取上清液在平板培养基上划线涂布，将平板倒置在20～28℃下培养12～48h，所述平板培养基中，1L培养基中含有如下成分：琼脂1～2％，蛋白胨10g，酵母提取物5g，NaCl 5g，pH 5.0～9.0；

2)将步骤1)中平板培养后得到的菌落，挑取不同形态菌落置于选择培养基中，培养24～48h后，取上清液，涂布由选择培养基加2％琼脂制成的平板培养基，将平板倒置在20～28℃下培养12～48h，将菌落数最多的菌选出，所述选择培养基中，1L培养基中含有如下成分：罗布麻麻皮粉碎后制备的麻皮粉0.01～2g，NaCl 5g，pH 5.0～7.0；

3)将步骤2)选出的菌接入发酵培养基中培养至对数生长期，移取5ml菌液至直径为9cm的培养皿中，用功率为15W的紫外线灯管距离30cm照射5～20min，避光保存8-24h后，转移至发酵培养基中，20～28℃，80～320rpm培养至对数生长期，然后再以10％的接种量转接到pH为9的选择培养基中20～28℃，80～320rpm培养24h后，取菌液涂布到由选择培养基加2％琼脂制成的平板培养基，倒置条件下20～28℃培养12～48h，同时以10％的接种量转接到新的pH为9的选择培养基中20～28℃，80～320rpm培养24h后，重复上述操作，直至平板上的菌落数不再增加，则在平板上选择最大的单菌落挑出；所述的发酵培养基中，1L培养基含有如下成分：果胶2～3g，木聚糖1～2g，蛋白胨5～10g，NaCl 5g，pH 5.0～7.0；

4)将步骤3)选出的菌按照步骤3)中的操作再次进行紫外线诱变处理后，将诱变菌群接入pH为10的选择培养基中20～28℃，80～320rpm培养，继续按照步骤(3)中的操作进行连续转接，直至平板上的菌落数不再增加，则在平板上选择最大的单菌落挑出；

5)将步骤4)选出的菌接入发酵培养基中20～28℃，80～320rpm培养至对数生长期，加入氯化锂使其浓度为0.1～1.5％，保温0.5-10min，取菌液5ml离心洗涤3次后，转移至pH为11的选择培养基中20～28℃，80～320rpm培养至对数生长期，然后再转接到选择培养基中20～28℃，80～320rpm培养24h后，以10％的接种量转接到新的选择培养基中20～28℃，80～320rpm培养24h后，取菌液涂布到由选择培养基加2％琼脂制成的平板培养基，倒置条件下20～28℃培养12～48h，同时以10％的接种量转接到新的选择培养基中20～28℃，80～320rpm培养24h后，重复上述操作，直至平板上的菌落数不再增加，则在平板上选择最大的单菌落挑出，以10％的接种量转接到新的选择培养基中培养至对数期，得到种子菌液；

罗布麻脱胶过程如下：

1)取罗布麻麻皮以1∶10～50的浴比浸渍于水中10～120min，向麻皮浸渍液中加入0.5％～1％蛋白胨，0.5％～0.9％NaCl，然后将麻皮及浸渍液置于115～130℃条件下保温10～30min；

2)将步骤1)处理后的麻皮及浸渍液用氢氧化钠溶液调pH至9～12，并加入0.5～10g/L的渗透剂JFC或渗透剂BX或渗透剂T或吐温80，将所述微生物种子菌液获取过程中的步骤(5)中得到的种子菌液以5～20％的接种量转接到调整pH后的麻皮浸渍液中，20～28℃，80～320rpm培养4～36h；

3)将步骤2)的麻皮处理液中加入35％的双氧水2～20g/L，35％的硅酸钠1～10g/L，温度85～100℃保温15～120min；

4)将步骤3)处理结束后的麻纤维转移至清水中，加盐酸溶液调整pH为7～8，加入过氧化氢酶0.1～20g/L，20～28℃搅拌状态下保温10～30min，取出纤维即得到脱胶处理后的罗布麻纤维。