[发明专利]一种狭叶红景天种苗的快速培育方法

说明书

本发明公开了一种狭叶红景天种苗的快速培育方法，该方法以狭叶红景天的子叶柄为外植体，通过对外植体的胚性细胞和胚状体的诱导培养，成功培育出狭叶红景天的优质种苗，为狭叶红景天优质种苗的大量快速培育提供了一条新途径。

技术领域

本发明涉及一种狭叶红景天种苗的快速培育方法，特别是涉及一种通过诱导狭叶红景天胚状体而实现狭叶红景天植株快速繁育的方法。

背景技术

狭叶红景天Rhodiola kirilowii(Regel)Maxim.系蔷薇目景天科红景天，属(Rhodiola L.)多年生草本。分布于我国西藏、青海、四川、云南等地海拔2000～5600m的高寒地区，为我国著名的高寒中藏医药材。狭叶红景天具有清热退烧、解毒和防瘟作用，可治疗肺炎、发烧、腹泻和四肢肿胀等症。现代药理研究表明，红景天具有消热解毒、抗疲劳、抗缺氧、抗衰老等功效。狭叶红景天为雌雄异株植物，其种子微小，不易得到，且难以人工栽培，目前狭叶红景天植物主要以野生资源为药源。由于其特殊的功效和需求量急剧加大，使得野生资源也日益减少。另外，狭叶红景天植物具有能在贫瘠的沙漠地带很好生长的特性，同时兼有保持水土和保护生态环境的效果；因此狭叶红景天又可作为治理土壤沙化的优质树种。因此积极开展对狭叶红景天的种苗大量培育具有十分重要的意义。

目前已有人对狭叶红景天种苗快速培育进行了研究，如李建民等人采用狭叶红景天的顶芽为外植体，经不定芽增殖培养和生根培养获得了狭叶红景天再生植株。本专利是以狭叶红景天的子叶柄为外植体，通过诱导胚状体来获得狭叶红景天再生植株，目前该方法还未见有任何报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种狭叶红景天种苗的快速培育方法，该方法以狭叶红景天的子叶柄为外植体，通过诱导胚状体进而获得狭叶红景天的再生植株。

本发明提供的狭叶红景天种苗的快速培育方法包括如下步骤：

(1)外植体的获得

a.选取已成熟的狭叶红景天种子，将其消毒处理后接入MS+酵母提取物50～100mg·L^-1培养基中，在每天光照10～14小时、光照强度为700～1200lx和每天在5～8℃和20～25℃各培养12小时的条件下进行种子的萌发生长培养；

b.取已萌发的狭叶红景天种子，转接入MS+川荞一号种子50～100g·L^-1培养基中培养，在培养温度为15～25℃、每天光照8～12小时、光照强度为1500～2000lx的条件下培养20天后，选取直径在1mm以上、长度为0.5～1.5cm的子叶柄作为外植体；

(2)胚性组织细胞的培养：将子叶柄外植体靠近胚轴端部分插入到培养基B₅+2,4-D 1.0～3.0mg·L^-1+NAA 0.1～0.5mg·L^-1+酵母多糖80～200mg·L^-1中，在培养温度为12～28℃、每天光照10～18小时、光照强度为1000～1500lx的条件下培养15～25天后，插入培养基中的子叶柄产生胚性组织细胞；

(3)胚状体的产生：切取步骤(2)中产生的胚性组织细胞，以50～100g·L^-1的接种量接入液体培养基1/2MS+TDZ1.0～3.0mg·L^-1+NAA0.5～2.0mg·L^-1+酵母提取物100～300mg·L^-1中，在摇床转速为80～100r·min^-1、培养温度18～25℃、每天光照8～16小时和光照强度为1000～2000lx的条件下培养15～20天后，再转入1/2MS+6BA1～3.0mg·L^-1+NAA0.5～2mg·L^-1+酵母多糖200～400mg·L^-1固体培养基中进行培养，培养温度和光照条件与液体培养基中培养相同，培养25～35天后在胚性组织细胞表面产生胚状体；