[发明专利]重组嗜酸乳杆菌S层蛋白在大肠杆菌中的高效表达及其应用有效

专利信息
申请号: 201610802394.1 申请日: 2016-09-05
公开(公告)号: CN106282178B 公开(公告)日: 2019-06-04
发明(设计)人: 庾庆华;高雪;黄璐璐;叶露露;侯起航 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/31;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/335;A61K38/16;A61P31/16
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 王艳
地址: 21009*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 嗜酸乳杆菌 重组蛋白 蛋白 大肠杆菌 重组菌株 重组质粒 构建 重组嗜酸乳杆菌 重组大肠杆菌 树突状细胞 载体pGEXS 蛋白表达 蛋白基因 高效表达 提取纯化 种试剂盒 引物 拮抗 柱子 应用 侵袭
【权利要求书】:

1.重组质粒pGEXS、重组菌株、重组蛋白在制备拮抗H9N2禽流感病毒侵袭树突状细胞药物中的应用,其特征在于,所述重组质粒pGEXS是用限制性内切酶XhoI和BamHI将pGEX-4t-2质粒线性化,将线性化的pGEX-4t-2质粒与表达 嗜酸乳杆菌ATCC 4356 S 层蛋白的目的基因序列进行连接获得,所述重组菌株是重组质粒pGEXS导入大肠杆菌Rosetta-gami2中即得,所述重组蛋白是将重组菌诱导表达得到菌体,将菌体加入PBS重悬离心,重悬液进行超声破碎,破碎后的得到的菌液离心,收集上清和沉淀进行SDS-PAGE验证,将收集的上清过GST柱子,纯化提取得到S层蛋白即得。

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