[发明专利]一种三联核酸检测试剂盒有效
| 申请号: | 201610765955.5 | 申请日: | 2016-08-30 |
| 公开(公告)号: | CN106319055B | 公开(公告)日: | 2019-12-13 |
| 发明(设计)人: | 李可可;韩钊;任卫新;李智鑫;王楠;李松强;苑庆华;辛鹤林 | 申请(专利权)人: | 天津喜诺生物医药有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12R1/66;C12R1/645;C12R1/725 |
| 代理公司: | 12209 天津盛理知识产权代理有限公司 | 代理人: | 韩奎勇 |
| 地址: | 300480 天津市滨海新区*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 白色念珠菌 新型隐球菌 发射波长 曲霉菌 激发波长 检测反应 菌体 三联 核酸检测试剂盒 种特异性探针 种特异性引物 菌体裂解液 特异性探针 特异性引物 标记报告 淬灭基团 辅助诊断 核酸定量 检测试剂 阴性对照 荧光染料 试剂盒 霉菌 种曲 内参 感染 | ||
1.一种三联核酸检测试剂盒,该试剂盒包括菌体裂解液,阳性定量反应液,阴性对照反应液及菌体检测反应液,其特征在于:所述菌体检测反应液中包含曲霉菌、新型隐球菌及白色念珠菌的特异性引物、特异性探针及内参荧光染料,其中,所述菌体检测反应液中三种特异性引物根据曲霉菌、新型隐球菌及白色念珠菌ITS序列的区域所设计,其中,所述菌体检测反应液中三种特异性探针的标记报告基团分别选用的是FAM、VIC和CY-5,淬灭基团为MGB,FAM基团的激发波长为492nm,发射波长为517nm;VIC基团的激发波长为557nm,发射波长为574nm;CY-5基团的发射波长为646nm,发射波长为664nm;FAM、VIC和CY-5基团激发波长和发射波长之间没有交叉重叠区段,故均不存在相互干扰的现象,进而实现了三种菌同时进行特异性检测;
所述菌体检测反应液的组成成分如下:
所述菌体检测反应液中特异引物和特异性探针序列分别为:
曲霉特异性引物正向:SQ1 5’-AAGCACGGCTTGTGTGTTGG-3’
曲霉特异性引物反向:SQ2 5’-AGCCCCATACGCTCGAGGA-3’
曲霉特异性探针:SQ3 5’-FAM-AAGGCAGCGGCGGCA-MGB-3’
新型隐球菌特异性引物正向:SQ4 5’-GTTTTATTACCTGTTGGACTTGGATTTG-3’
新型隐球菌特异性引物反向:SQ5 5’-GGTTGTTATCAGCAAGCCGAAG-3’
型隐球菌特异性探针:SQ6 5’-VIC-TGTGTTAGTGGGAAGGT-MGB-3’
白色念珠菌特异性引物正向:SQ7 5’-CGCTGGGTTTGGTGTTGAG-3’
白色念珠菌特异性引物反向:SQ8 5’-CGCCTTACCACTACCGTCTTTC-3’
白色念珠菌特异性探针:SQ9 5’-CY 5-AATACGACTTGGGTTTGCT-MGB-3’。
2.根据权利要求1所述的三联核酸检测试剂盒,其特征在于:所述内参荧光染料为RQX。
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