[发明专利]一种从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法

说明书

本发明公开了一种从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法。所述方法以青稞谷粒为原料，经过研磨、过筛、酶解、碱提、透析、醇沉、真空冷冻干燥、脱脂得到粗制样品，其溶解后再依次经由填料cellulose DE‑32和S‑400洗脱得到纯化样品。所述方法能有效从青稞谷粒中分离得到高纯度的阿拉伯木聚糖，其粗制样品中阿拉伯木聚糖的提取率为13.8％，提纯纯度为96.08％。

技术领域

本发明涉及一种从青稞中分离纯化阿拉伯木聚糖的方法，具体涉及一种从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法。

背景技术

阿拉伯木聚糖(Arabinoxylans，AX)是一种非淀粉源的杂多糖，主要由木糖和阿拉伯糖构成，广泛存在于自然界特别是谷类作物中。根据其水溶性特点，阿拉伯木聚糖又分为水溶性和水不溶性两类。相比较而言，水溶性阿拉伯木聚糖结构相对简单，含量也比较低；水不溶性阿拉伯木聚糖结构相对复杂，分子内及分子间交联程度较高。体内和体外实验表明，阿拉伯木聚糖具有增加排便量、降血糖、降胆固醇、抗氧化、调节免疫甚至抗肿瘤等功效，其应用价值高、应用前景广泛。

青稞生长在严寒缺氧的高原地带，是藏族人民每日饮食当中最主要的碳水化合物来源，具有突出的医疗保健功效，被认为是藏族人民长寿的重要因素之一。严寒、缺氧、干燥、强光照射等特殊环境使得青稞获得了极强的抗逆性，产生了十分丰富的次生代谢产物。青稞也因其营养组成全面且独特、食疗价值高而越来越受到民众青睐。有学者指出，青稞中的β-葡聚糖含量普遍高于世界其它地区种植的大麦品种。因此β-葡聚糖也被认为是青稞中与人体健康和长寿关系最为密切的营养物质。然而，近些年来谷类作物中阿拉伯木聚糖的生理功效也越来越多地见诸报道并被肯定。

对阿拉伯木聚糖的研究主要聚焦在小麦、大麦、玉米等谷类作物，其提取方法也主要分为水法、碱法、酶法以及这些方法的联用。国内外对裸大麦(青稞即为裸大麦的一种)中阿拉伯木聚糖的研究相对较少。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术中存在的不足，提供一种从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法。所述方法以青稞谷粒为原料，经过研磨、过筛、酶解、碱液溶解、透析、醇沉、真空冷冻干燥、脱脂得到粗制样品，其溶解后再依次经由填料celluloseDE-32和S-400洗脱得到纯化样品。所述方法能有效从青稞谷粒中分离得到高纯度的阿拉伯木聚糖，可用于其结构解析、理化性质鉴定及生物活性研究等。

为实现上述目的，本发明采用以下方案：

本发明涉及一种从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，所述方法包括以下步骤：

S1、酶解：取青稞谷粒粉末样品加蒸馏水溶解，依次加入α-淀粉酶、木瓜蛋白酶、糖化酶进行酶解，酶解液离心；

S2、碱提：酶解沉淀物加入碱液进行溶解，调节pH值至6.5～6.8，离心；

S3、醇沉：碱提上清液中滴加2～3倍体积无水乙醇，静置过夜，离心；

S4、真空冷冻干燥：醇沉沉淀物用蒸馏水复溶后浓缩、真空冷冻干燥，得固体粉末；

S5、脱脂：以正己烷为溶剂，在60～90℃水浴条件下对固体粉末进行索氏提取，低温烘干得粗制样品；

S6、DE-32洗脱：取粗制样品加蒸馏水溶解，离心；上清液经由DE-32洗脱；苯酚-硫酸法遴选有糖试管，合并滤液，60～90℃水浴蒸发浓缩得浓缩液；

S7、S-400洗脱：浓缩液经由S-400洗脱；苯酚-硫酸法遴选有糖试管，依次测定各有糖试管中滤液的糖分组成及纯度，合并单一糖分相同且纯度>90％的滤液，并按单一糖分不同分开收集；60～90℃水浴蒸发浓缩，真空冷冻干燥得纯化样品粉末，根据纯化样品的液相色谱检测结果以及单糖分析实验获得阿拉伯木聚糖。