[发明专利]一种从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法

权利要求书

1.一种从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，其特征在于，所述方法由以下步骤组成：

S1、酶解：取青稞谷粒粉末样品加蒸馏水溶解，依次加入耐高温α-淀粉酶、木瓜蛋白酶、糖化酶进行酶解，酶解液离心；

S2、碱提：酶解沉淀物加入碱液进行溶解，调节pH值至6.5～6.8，离心；

S3、醇沉：碱提上清液中滴加2～3倍体积无水乙醇，静置过夜，离心；

S4、真空冷冻干燥：醇沉沉淀物用蒸馏水复溶后浓缩、真空冷冻干燥，得固体粉末；

S5、脱脂：以正己烷为溶剂，在60～90℃水浴条件下对固体粉末进行索氏提取，低温烘干得粗制样品；

S6、DE-32洗脱：取粗制样品加蒸馏水溶解，离心；上清液经由DE-32洗脱；苯酚—硫酸法遴选有糖试管，合并滤液，60～90℃水浴蒸发浓缩得浓缩液；

S7、S-400洗脱：浓缩液经由S-400洗脱；苯酚—硫酸法遴选有糖试管，依次测定各有糖试管中滤液的糖分组成及纯度，合并单一糖分相同且纯度>90％的滤液；60～90℃水浴蒸发浓缩，真空冷冻干燥得纯化样品粉末，根据纯化样品的液相色谱检测结果以及单糖分析实验获得阿拉伯木聚糖；

步骤S1中，青稞谷粒粉末样品与蒸馏水的用量比为10g:60～90mL；依次加入耐高温α-淀粉酶、木瓜蛋白酶、糖化酶进行酶解具体为：加入50～100μL耐高温α-淀粉酶，80～100℃水浴1～2h；水浴温度调至60～80℃，加入10～20mg木瓜蛋白酶，水浴1～2h；100℃水浴灭酶10～20min，冷却后加入100～500μL糖化酶，60～80℃水浴1～2h；100℃水浴灭酶10～20min，冷却后60～90℃水浴2～4h；

步骤S2中，酶解沉淀物加60～90mL0.1～1.0mol/LNaOH溶液溶解，60～90℃水浴2～4h；用浓HCl溶液调碱提液pH值至6.5～6.8，离心。

2.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，其特征在于，步骤S3中，所述碱提上清液为透析后的碱提上清液。

3.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，其特征在于，步骤S4中，醇沉沉淀物用60～90mL蒸馏水复溶，60～90℃水浴蒸发浓缩至5～10mL；-20℃冷冻后，真空冷冻干燥24～48h。

4.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，其特征在于，步骤S5中，所述索氏提取为反复抽提6～8h；所述低温烘干的温度为30～50℃。

5.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，其特征在于，步骤S6中，DE-32洗脱时，流速为0.1～1.0mL/min，流动相依次为蒸馏水和0.5～1.0mol/L的NaCl溶液；蒸馏水洗脱的滤液弃去，NaCl溶液洗脱的滤液留存；层析柱的规格为：2.6cmx30cm。

6.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，其特征在于，步骤S7中，S-400洗脱时，流速为0.1～1.0mL/min，流动相为蒸馏水；层析柱的规格为：1.6cm x100cm。

7.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化阿拉伯木聚糖的方法，其特征在于，步骤S7中，采用配备了示差检测器的高效液相色谱仪依次测定各有糖试管中滤液的糖分组成及纯度；所述高效液相色谱仪检测时示差检测器型号为Waters 2414，糖柱型号为SUGARKS-805示差检测器温度为30℃，柱温为30～60℃；流动相为蒸馏水，流速为0.5～1.0mL/min。