[发明专利]一种续随子二萜醇的制备方法

说明书

本发明公开了一种续随子二萜醇的制备方法，该制备方法包括以下步骤：a、取千金子（市购）为原料，进行粉碎得到千金子粉末；b、以适当溶剂回流提取，合并提取液，减压浓缩至稠膏；c、将上述稠膏中加入碱液进行水解；d、向上述碱水解液中加入酸调pH值6‑7；e、将上述中和后的水解液减压浓缩至稠浸膏，进行硅胶柱层析，得到续随子二萜醇粗品；f、将得到的续随子二萜醇粗品以石油醚‑乙酸乙酯混合溶剂重结晶，得所述的结晶产品。本发明具有操作简单、溶剂消耗少、工艺稳定等优点，可适用于实验室和工业化制备。

技术领域

本发明涉及一种续随子二萜醇的制备方法，属于中药分离纯化技术领域。

背景技术

续随子二萜醇，也称千金子二萜醇，英文名lathyrol，分子式为C₂₀H₃₀O₄，分子量为334，来源于大戟科大戟属植物千金子，以其为母核的衍生物表现出较好的细胞毒作用和抑制肿瘤细胞作用。其结构式如下：

千金子为大戟科植物续随子Euphorbia lathyris L. 的干燥成熟种子，味辛、性温，有毒，具有泻下逐水，破血消癥功能，外用可治疗水肿、痰饮、积滞胀痛、二便不通、血瘀经闭，外治顽廯、疣赘。千金子中主要含有大量脂肪油，还含有二萜、香豆素、挥发油等化合物，现代研究表明，二萜类化合物是其主要成分，也是其重要的活性成分。千金子中含有的结构独特的千金二萜烷型成分L-factor，此类成分除具有诸多的药理活性，如细胞毒作用和抑制肿瘤细胞的P-糖蛋白的外排药物功能，提高化疗药物在肿瘤细胞内的有效质量浓度，逆转多药耐药。近年的研究表明，具有假白榄烷和千金二萜烷骨架的化合物有望成为多种抗肿瘤多药耐药即P-糖蛋白调节剂的先导化合物。

续随子二萜醇作为千金二萜烷型二萜酯的母核，可以作为前体化合物，合成一系列新的具有潜在的抗肿瘤多药耐药活性的化合物，以阐明其结构与活性之间的关系，为研究这类二萜化合物的抗肿瘤多药耐药机制和药物的开发奠定基础。

目前文献和专利大多是关于千金二萜烷型二萜酯提取分离，如焦威发表的千金子化学成分研究，如浙江工业大学硕士论文半边旗和千金子化学成分研究、吉林大学千金子化学成分的研究，再如发明专利CN100420680一种千金子甾醇的提取、分离方法等，均对千金子中化学成分进行分离和结构鉴定，未见从千金子中分离制备高纯度续随子二萜醇的报道。

万忠民（成都理工大学硕士论文，2013年）利用5%KOH/MeOH水解化合物Euphorbiafactor L₃，并利用硅胶柱色谱分离得到化合物lathyrol。但该方法是先将化合物分离，然后再进行水解，此操作一方面难以充分的将以续随子二萜醇为母核的化合物富集起来，另一方面化合物分离也具有一定的难度，因此无法应用于工业大生产。

发明内容

（1）本发明要解决的技术问题在于提供一种利于大生产操作的从千金子中大量分离制备高纯度续随子二萜醇的方法。

（2）为解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

a、药材粉碎：取千金子（市购）为原料，进行粉碎得到千金子粉末；

b、回流提取及浓缩：以体积比80-100%的溶剂回流提取，合并提取液，减压浓缩至稠膏，提取所用溶剂为甲醇、乙醇或其混合物；

c、碱水解：将上述稠膏中加入碱液进行水解0-24小时；

d、中和：向上述碱水解液中加入酸调pH值6-7；

e、硅胶柱层析：将上述中和后的水解液减压浓缩至稠浸膏，然后与硅胶重量比1:1-1:3拌样，烘干后进行硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得到续随子二萜醇粗品；

f、重结晶纯化：将得到的续随子二萜醇粗品以石油醚-乙酸乙酯混合溶剂重结晶，得所述的结晶产品。