[发明专利]用于构建融合蛋白的连接肽

权利要求书

1.一种用于构建融合蛋白的连接肽，由柔性肽和刚性肽组成，所述柔性肽包含1个或多个柔性单元，和所述刚性肽包含1个或多个刚性单元；其中，所述柔性单元氨基酸组成的结构通式为(GS)a(GGS)b(GGGS)c(GGGGS)d，其中a，b，c和d是大于或等于0的整数，且a+b+c+d≥1；和所述刚性单元选自如下序列：

(i)SSSSKAPPPSLPSPSRLPGPSDTPILPQ；

(ii)PRFQDSSSSKAPPPSLPSPSRLPGPSDTPILPQ；

(iii)SSSSKAPPPS；

(iv)SRLPGPSDTPILPQ；

(v)SSSSKAPPPSLPSPSR。

2.如权利要求1所述的连接肽，其特征在于，刚性肽位于柔性肽的C末端。

3.如权利要求1所述的连接肽，其特征在于，所述柔性单元选自如下序列：

(i)GSGGGSGGGGSGGGGS；

(ii)GSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS；

(iii)GSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS；

(iv)GSGGGGSGGGGSGGGGS；

(v)GGGSGGGSGGGSGGGSGGGS；

(vi)GGSGGSGGSGGS。

4.如权利要求1所述的连接肽，其特征在于，所述刚性肽包含1，2，3，4或5个刚性单元。

5.如权利要求1所述的连接肽，其特征在于，所述连接肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：2、3、4、5、6或7所示。

6.一种融合蛋白，其结构通式表示为K1-L-K2或K2-L-K1，其中K1是第一种生物活性分子；L是如权利要求1-5任一项所述连接肽；K2是第二种生物活性分子；且所述活性分子K1或K2选自蛋白或蛋白结构域、多肽、抗体或抗体片段。

7.如权利要求6所述的融合蛋白，其特征在于，所述活性分子K1包含可溶性或者膜信号分子、细胞因子、生长因子、激素、共刺激分子、酶、受体或对于受体具有配体功能的蛋白或者多肽；和所述活性分子K2为能够延长活性分子K1循环半衰期的蛋白或蛋白结构域。

8.如权利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述活性分子K2选自人血白蛋白、转铁蛋白和免疫球蛋白Fc片段。

9.如权利要求6所述的融合蛋白，其特征在于，所述活性分子K1包含毒素、酶、细胞因子、膜蛋白或免疫调节细胞因子；和所述活性分子K2包含抗体或抗体片段，且K1和K2通过所述连接肽L连接形成抗体融合蛋白。

10.如权利要求6-9任一项所述的融合蛋白，其特征在于，所述生物活性分子K1包含腺苷A1受体、血管紧张素转换酶ACE、Activin家族、ADAM家族、ALK家族、α-1-抗胰蛋白酶、细胞程序性死亡相关蛋白家族、神经生长因子及受体家族、骨形态发生蛋白BMP及受体家族、补体因子、降钙素、癌症相关抗原、组织蛋白酶家族、CCL趋化因子及受体家族、CD超家族、CFTR、CXCL趋化因子及受体家族、EGF、表皮生长因子EGF及受体家族、凝血因子IIa、因子VII、因子VIII、因子IX、铁蛋白、成纤维细胞生长因子FGF及受体家族、促卵泡激素、FZD家族、HGF、胰高血糖素、心肌肌球蛋白、生长激素、Ig、IgA受体、IgE、胰岛素样生长因子IGF及结合蛋白家族、白细胞介素IL超家族及其受体超家族、干扰素INF家族、iNOS、整联蛋白家族、激肽释放酶家族、层粘连蛋白、L-选择蛋白、黄体生成素、MMP家族、粘蛋白家族、钙粘蛋白超家族、血小板衍生生长因子PDGF及受体家族、甲状旁腺激素、血清白蛋白、T-细胞相关受体超家族、TGF-α、转化生长因子TGFβ超家族、促甲状腺激素、促甲状旁腺激素、肿瘤坏死因子TNF超家族及其受体TNFRSF超家族、尿激酶、WNT信号通路蛋白家族、胸腺肽α1、胸腺肽β4、VEGF、血管内皮生长因子VEGF或其受体家族。