[发明专利]一种利用冷酚法提取甲型副伤寒沙门氏菌脂多糖的工艺有效
| 申请号： | 201610679442.2 | 申请日： | 2016-08-18 |
| 公开（公告）号： | CN106317238B | 公开（公告）日： | 2020-06-09 |
| 发明（设计）人： | 周富昌 | 申请（专利权）人： | 罗益（无锡）生物制药有限公司 |
| 主分类号： | C08B37/00 | 分类号： | C08B37/00 |
| 代理公司： | 广州市红荔专利代理有限公司 44214 | 代理人： | 关家强;吴伟文 |
| 地址： | 214028 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 冷酚法 提取 副伤寒 沙门氏菌 多糖 工艺 | ||
1.一种利用冷酚法提取甲型副伤寒沙门氏菌脂多糖的工艺，其特征在于，所述提取工艺包括如下步骤：
步骤a：菌体处理：取适量菌体称重后，按比例加入注射水，并将菌体捣碎；
步骤b：第一次提取：向步骤a处理后的菌体中加入苯酚，并在水浴中加热 1-3 h，然后将得到的溶液置于冷库中过夜，然后离心分离，收取上清液；
步骤c：第二次提取：向步骤b中得到的上清液中加入冷酚，振摇 8-20min后离心分离，收取上清液，并将上清液置于透析袋中透析；
步骤d：提取LPS：向步骤c透析后的溶液中加入MgCl2和 NaAc，至终浓度为0.1-0.3mol/lMgCl2 和0.02-0.05mol/l NaAc；再向其中加入乙醇至终浓度75%，离心分离，收集沉淀，得到粗提 LPS；所述步骤a中，菌体与注射水的用量比是1：（8-10）；所述步骤b中苯酚的用量与菌体的用量比是（1-2）：（1-3）；所述步骤c中加入70%浓度的冷酚，所述冷酚与所述上清液的用量比是（1-2）：（1-3）；所述步骤d中加入1mol/L MgCl2 和3mol/ L NaAc；所述步骤d中加入95%乙醇；所述步骤 d 中离心是在离心机9000rpm 的转速下离心10min。
2.根据权利要求1所述的利用冷酚法提取甲型副伤寒沙门氏菌脂多糖的工艺，其特征在于，所述步骤 b 中加入的是浓度为90%的苯酚。
3.根据权利要求1所述的利用冷酚法提取甲型副伤寒沙门氏菌脂多糖的工艺，其特征在于，所述水浴的温度维持在 60-70℃之间。
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