[发明专利]小片段BMG抗体的制备方法及β2-微球蛋白检测试剂盒

权利要求书

1.一种小片段BMG抗体的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

用蛋白酶对BMG抗体进行水解，得到Fab片段；

用二硫苏糖醇打开所述Fab片段的二硫键，暴露出巯基后，用人工多肽进行偶联，得到所述的小片段BMG抗体。

2.如权利要求1所述的小片段BMG抗体的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶中的一种或几种。

3.如权利要求1所述的小片段BMG抗体的制备方法，其特征在于，所述人工多肽为三肽、四肽、五肽中的一种或几种。

4.一种含有权利要求1所述的小片段BMG抗体的β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂、R2试剂和校准品，所述R1试剂为含有解离蛋白剂的磷酸盐缓冲体系，所述试剂R2为含有包被了所述小片段BMG抗体的胶乳颗粒的缓冲体系，所述校准品包括5支不同BMG浓度的牛血清基质。

5.如权利要求4所述的β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述R1试剂包含如下成分：pH为7.0～7.6、浓度为10～100mmol/L磷酸盐缓冲液，浓度为200～500mmol/L解离蛋白剂，浓度为5～20mmol/L乙二胺四乙酸二钠，浓度为10～50mmol/L氯化钠以及体积分数为0.01％～0.05％的防腐剂。

6.根据权利要求5所述的β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述解离蛋白剂为尿素、曲拉通X-100、盐酸胍中的一种或几种；所述防腐剂为Proclin 300。

7.根据权利要求4所述的β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述R2试剂包含如下成分：pH为7.0～7.6、浓度为10～100mmol/L磷酸盐缓冲液，小片段BMG抗体包被的致敏乳胶颗粒。

8.根据权利要求7所述的β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述的致敏乳胶颗粒为聚甲基丙烯酸甲酯微球。

9.根据权利要求7所述的β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述小片段BMG抗体包被的致敏乳胶颗粒的制备方法包括如下步骤：

S1：将小片段BMG抗体加入粒径为100～200nm的致敏乳胶颗粒的乳液中，控制小片段BMG抗体抗体与乳胶粒子的体积比为0.2～1:1，室温孵育1小时，得到溶液；

S2：将碳化二亚胺加入步骤S1所得溶液中，控制每毫升乳胶粒子中加入5mg碳化二亚胺，室温孵育2小时，得到悬浮液；

S3：将步骤S2所得悬浮液进行固液分离后，取固体部分用磷酸盐缓冲液洗涤分散即可。

10.根据权利要求4所述的β2-微球蛋白检测试剂盒，其特征在于，5支所述牛血清基质校准品的BMG浓度分别为1.25mg/L、2.5mg/L、5mg/L、10mg/L和20mg/L。