[发明专利]全局肿瘤标志物表达水平的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学检测领域，具体而言，涉及一种全局肿瘤标志物表达水平的检测方法。

背景技术

单核-巨噬细胞包括骨髓中的前单核细胞、外周血中的单核细胞、以及组织内的巨噬细胞。人类外周血细胞主要分为无核细胞(主要为血红细胞)和有核细胞(白细胞等)。单核细胞约占有核细胞总数的5％左右，由髓系造血祖细胞分化而来，是免疫系统中抗原递呈细胞(APC细胞)的重要组分。

在人体外周循环血液中，白细胞分布在两个地方，即循环池和储存池，循环池就是流动血液中的白细胞，储存池就是附着在血管壁，淋巴结，骨髓等处的白细胞，暂时不参与血液循环，但储存池中的白细胞与循环池中的白细胞保持动态平衡。白细胞在人体循环系统内成熟分化并实现免疫学功能可以大致分为以下步骤：毛细血管中的单核细胞→透过血管壁进入血管外组织→发现异源性物质(细菌、病原体、肿瘤细胞等)→分化为成熟的巨噬细胞→吞噬并消化→将抗原递呈到特定的细胞表面分子上→经由淋巴管回流到外周血→完成抗原递呈激活杀伤性免疫细胞。

作为机体抗击外来病原侵袭和清楚自身非正常细胞机制的哨兵，巨噬细胞是免疫系统形成免疫应答的重要环节，作用重大。在正常人体内每时每刻都有向着肿瘤化(永生化、非正常凋亡)发展的细胞产生，正常的机体免疫机制可以通过上述过程，将其及时清除。由此可见无论健康人群还是癌症患者体内巨噬细胞对于肿瘤化细胞的吞噬作用，都是无时无刻不在进行的，针对单核-巨噬细胞内肿瘤来源物质(包括蛋白质、核算、脂类等)的观测，可以为我们提供一个监控体内肿瘤发生、发展的崭新视角，其应用前景必然非常广泛。

单核-巨噬细胞作为有核细胞的重要组分，实验室一般是通过其表面抗原分子CD14和CD16进行检测的，目前可以买到成熟的抗体。主要的临床应用集中在血细胞组成检测和造血系统肿瘤(如：粒/单核细胞性白血病)方面的检测中，为临床诊断提供重要参考。但将其与实体肿瘤的监控相联系，就目前专利和文献检索来看，仍然缺少足够多的系统性的相关研究，且尚未形成成熟产品，在中国大陆地区也没有相关专利授权。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种全局肿瘤标志物表达水平的检测方法以解决上述问题。

一种全局肿瘤标志物表达水平的检测方法，包括以下步骤：

用CD14和CD16的抗体标记出待检测对象外周血中的CD14⁺CD16⁺细胞，去除除白细胞之外的大部分杂质后用待检测的抗肿瘤标志物X的抗体标记该肿瘤标志物；

检测X⁺CD14⁺CD16⁺细胞与CD14⁺CD16⁺的细胞数量并统计前者与后者细胞数量的比值。

目前已经确定人类外周血中存在不同亚型的单核细胞。已知的主要根据CD14和CD16抗原的表达分为4个亚型：CD14⁺⁺CD16^－(G1亚型)，CD14⁺⁺CD16⁺(G2亚型)，CD14⁺CD16^－(G3亚型)，CD14⁺CD16⁺(G4亚型)。CD14⁺CD16⁺是其中最主要的亚型之一，其比其他亚型的单核细胞具有更强的吞噬能力，因而从本发明的原理角度来讲，检测CD14⁺CD16⁺亚型的单核细胞更有意义。

肿瘤标志物(TM)，是指特征性存在于恶性肿瘤细胞，或由恶性肿瘤细胞异常产生的物质，或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质，并能反映肿瘤发生、发展，监测肿瘤对治疗反应的一类物质。当CD14⁺CD16⁺细胞吞噬肿瘤细胞时，肿瘤标志物便会在CD14⁺CD16⁺细胞富集，而CD14⁺CD16⁺细胞是在人体内循环运动的，因而可通过检测CD14⁺CD16⁺细胞中肿瘤标志物含量来方便的表征人体内的肿瘤标志物水平。