[发明专利]抗口蹄疫O型病毒的单克隆抗体及抗体组合以及其在该病毒抗原、抗体检测中的应用有效
申请号: | 201610586216.X | 申请日: | 2016-07-22 |
公开(公告)号: | CN106279408B | 公开(公告)日: | 2020-06-30 |
发明(设计)人: | 郑金来;吴园园 | 申请(专利权)人: | 北京标驰泽惠生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C12N15/13;C12N5/20;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/68 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人: | 鲁兵 |
地址: | 102629 北京市大兴区中关村科技园*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 口蹄疫 病毒 单克隆抗体 抗体 组合 及其 抗原 检测 中的 应用 | ||
1.口蹄疫O型病毒的非特异性单克隆抗体4H9anti,其特征在于:所述单克隆抗体4H9anti能够与常见口蹄疫O型病毒抗原O/GX/09-7、O/Mya98/XJ/2010、O/Mya98/BY/2010、O/JMS/2000、OZK/93结合且适用于对常见口蹄疫O型病毒的检测,其重链可变区的氨基酸序列如序列表中的SEQ ID No:13所示,其轻链可变区的氨基酸序列如序列表中的SEQ ID No:14所示。
2.编码权利要求1所述单克隆抗体4H9anti的基因(4H9anti),其特征在于:其重链可变区编码基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No:15所示,其轻链可变区编码基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No:16所示;其中序列表中的SEQ ID No:15由366个碱基组成,编码序列表中SEQ ID No:13所示的氨基酸残基序列的蛋白质,序列表中的SEQ ID No:16由312个碱基组成,编码序列表中SEQ ID No:14所示的氨基酸残基序列的蛋白质。
3.单克隆抗体4H9anti在制备检测口蹄疫O型病毒抗体的金标纸层析试纸中的应用。
4.一种口蹄疫O型病毒抗体检测金标纸层析试纸,由玻璃纤维膜样品垫、结合物释放垫、吸水垫、硝酸纤维素膜组成,硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线;其中:用权利要求1或2或3中提及的单克隆抗体4H9anti包被检测线,结合物释放垫上包被有用胶体金标记的口蹄疫O型病毒抗原;
所述口蹄疫O型抗原为O/GX/09-7、O/Mya98/XJ/2010、O/Mya98/BY/2010、O/JMS/2000、OZK/93中的几种组合。
5.根据权利要求4所述的口蹄疫O型病毒抗体检测金标纸层析试纸,其特征在于,所述口蹄疫O型抗原为O/JMS/2000毒株或者O/GX/09-7与O/Mya98/BY/2010的等质量混合物。
6.口蹄疫O型病毒抗体检测金标纸层析试纸盒,是将权利要求4或5所述口蹄疫O型病毒抗体检测金标纸层析试纸装入塑料卡中,制成测试卡,并组装成试纸盒,该试纸盒对应于样品垫的部位设有点样口,对应于检测线和质控线的部位设有观测窗。
7.一种用于检测口蹄疫O型病毒抗原的单克隆抗体组合,包括作为包被抗体的口蹄疫O型病毒的特异性单克隆抗体6D6anti和1F2anti及作为酶标抗体的非特异性单克隆抗体2H10anti和权利要求1所述的非特异性单克隆抗体4H9anti;
所述用于检测口蹄疫O型病毒抗原的单克隆抗体组合能检出的抗原包括口蹄疫O型常见病毒抗原O/GX/09-7、O/Mya98/XJ/2010、O/Mya98/BY/2010、O/JMS/2000和OZK/93中的任一种或其组合;
所述特异性单克隆抗体6D6anti为与口蹄疫O型病毒O/GX/09-7特异结合的多肽,其重链可变区的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No:1所示,轻链可变区的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No:2所示;
所述非特异性单克隆抗体2H10anti为与口蹄疫O型病毒O/GX/09-7非特异结合的多肽,其重链可变区的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No:5所示,轻链可变区的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No:6所示;
所述特异性单克隆抗体1F2anti为与口蹄疫O型病毒O/Mya98/BY/2010特异结合的多肽,其重链可变区的氨基酸序列为序列表中的SEQ ID No:9所示,轻链可变区的氨基酸序列为序列表中的SEQ ID No:10所示。
8.一种口蹄疫O型病毒抗原检测ELISA试剂盒,包括权利要求7所述的抗口蹄疫O型病毒的单克隆抗体组合,具体为作为包被抗体的口蹄疫O型病毒的特异性单克隆抗体6D6anti和1F2anti,和作为酶标抗体的非特异性单克隆抗体2H10anti和4H9anti。
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