[发明专利]粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法

权利要求书

1.粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法，其特征在于包含以下步骤：

S1孢子的消毒处理：

3～5月份粤紫萁孢子囊由深绿刚转为淡绿时，将孢子叶片摘下，收集孢子粉，用灭菌水浸泡5-10min，然后倒去上清液，加入0.1％的HgCl₂溶液消毒处理2-6min，灭菌水冲洗后加适量灭菌水混匀制成悬浮液；

或者，3～5月份粤紫萁孢子囊由深绿刚转为淡绿时，将每个孢子小叶摘下，用0.1％的HgCl₂溶液消毒处理2-6min，灭菌水冲洗后吸干表面水分，切成含2～3个孢子囊的小块；

S2原叶体的获得：

将步骤S1消毒处理的孢子囊小块或孢子粉，接种在MS基本培养基并添加6-苄基嘌呤0.5～1.5㎎/L、萘乙酸0.01～0.1㎎/L，做培养处理，孢子萌发后经过丝状体、片状体逐渐长成原叶体；

S3原叶体中幼孢子体的形成：

将步骤S2所获得的原叶体转入1/2MS、1/4MS培养基中，做培养处理，待原叶体体积明显增大时，再转入相同的固体培养基中培养，形成孢子体幼苗；

S4生根培养及移栽：

将步骤S3产生的孢子体幼苗接种在含吲哚丁酸0.5～1.0㎎/L的培养基中，做培养处理，20d长出幼根，待根形成后，继续在原瓶中培养1个月，移入盆中栽培。

2.如权利要求1所述的粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法，其特征在于，所述步骤S1中，孢子囊刚由深绿转为淡绿时，将孢子叶摘下，干燥处理后收集孢子粉。

3.如权利要求1所述的粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法，其特征在于，所述步骤S2之原叶体获得后，还可将获得的原叶体接种在MS基本培养基并含6-苄基嘌呤1.5～2.0㎎/L、萘乙酸0.1～0.5㎎/L的增殖培养基中,进行增殖培养,45d转接1次。

4.如权利要求1所述的粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法，其特征在于，所述步骤S3之原叶体中幼孢子体形成后，还包括幼孢子体的增殖培养步骤：将步骤S3产生的幼孢子体，接种在含6-糠基腺嘌呤0.5～1.0㎎/L、萘乙酸0.1㎎/L的孢子体增殖培养基中，培养处理后，45d在其基部诱导出新的幼孢子体。

5.如权利要求1所述的粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法，其特征在于，所述幼孢子体移入盆中采用下述栽培基质：

黄土：腐殖质，比例为1：1；

或者，河沙：黄土：腐殖质，比例为1：1：3；

或者，珍珠岩：黄土：腐殖质，比例为1：1：3。

6.如权利要求1-5任一项所述的粤紫萁可育孢子培养及其繁殖方法，其特征在于，所述培养处理条件为：温度(25±2)℃，光照12～16h/天，光照度1500～2000lx。