[发明专利]分离测定帕布昔利布中间体Z1及其有关物质的方法

权利要求书

1.分离帕布昔利布中间体Z1及其有关物质的方法，其特征在于，取供试品制备供试品溶液，然后以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以水和有机溶剂的混合液作为流动相进行洗脱，所述有机溶剂为甲醇、乙腈、乙醇、异丙醇中的一种或多种；所述帕布昔利布中间体Z1的结构式如式Ⅰ所示：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述有关物质包括如式Ⅱ所述的杂质1和/或如式Ⅲ所述的杂质2：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，制备供试品溶液采用的稀释剂为乙腈与0.05-0.2％三氟乙酸水溶液的混合溶液。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述乙腈与0.05-0.2％三氟乙酸水溶液的体积比为20-80：20-80。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的流动相，以0.01mol/L的六氟磷酸钾水溶液与有机溶剂的混合液作为流动相进行洗脱。

6.利用高效液相色谱法分离测定帕布昔利布中间体Z1及其有关物质的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以水和有机溶剂的混合液作为流动相；所述有关物质包括如式Ⅱ所述的杂质1和/或如式Ⅲ所述的杂质2，所述的方法具体包括以下步骤：

(1)配制稀释剂(空白溶液)：配置乙腈和0.05-0.2％三氟乙酸水溶液的混合溶液作为稀释剂(空白溶液)；所述乙腈与0.05-0.2％三氟乙酸水溶液的体积比为20-80：20-80；

(2)配制有关物质定位溶液：取帕布昔利布中间体Z1有关物质的对照品，用稀释剂溶解并稀释，得有关物质定位溶液；

(3)配制供试品溶液：取帕布昔利布中间体Z1样品，加稀释剂溶解并稀释，得供试品溶液；

(4)配制自身对照溶液：取步骤(3)所述供试品溶液再加稀释剂稀释，得自身对照溶液；

(5)配制杂质1标准溶液：取杂质1对照品，用稀释剂溶解并稀释至刻度，摇匀，即得杂质1标准溶液；

(6)分别取步骤(1)所述空白溶液、步骤(2)所述有关物质定位溶液、步骤(3)所述供试品溶液、步骤(4)所述自身对照溶液和步骤(5)所述杂质1标准溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，确定帕布昔利布中间体Z1及其有关物质的保留时间，按外标法计算供试品溶液中杂质1的含量，按自身对照法计算供试品溶液中杂质2及未知杂质的含量，总杂质含量为各已知杂质和未知杂质含量之和。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中高效液相色谱分析采用检测器的检测波长为210-280nm。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，以水和有机溶剂的混合液作为流动相进行梯度洗脱，所述梯度洗脱设置条件为：

0.01min：水与有机溶剂的体积比为55-65：35-45；

8min：水与有机溶剂的体积比为55-65：35-45；

18min：水与有机溶剂的体积比为25-35：65-75；

30min：水与有机溶剂的体积比为25-35：65-75；

31min：水与有机溶剂的体积比为55-65：35-45；

40min：水与有机溶剂的体积比为55-65：35-45。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，以水和有机溶剂的混合液作为流动相进行梯度洗脱，所述梯度洗脱设置条件为：

0.01min：水与有机溶剂的体积比为60：40；

8min：水与有机溶剂的体积比为60：40；

18min：水与有机溶剂的体积比为30：70；

30min：水与有机溶剂的体积比为30：70；

31min：水与有机溶剂的体积比为60：40；

40min：水与有机溶剂的体积比为60：40。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱箱温度为25-40℃，流动相流速为0.5ml/min-2.0ml/min。