[发明专利]抗FGFR2-IIIc单克隆抗体、杂交瘤细胞株和应用

权利要求书

1.一种抗FGFR2-IIIc单克隆抗体，其特征是，所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体特异性识别和结合SEQ ID NO:4所示的蛋白，并且所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体不与SEQ ID NO:5所示的蛋白结合。

2.如权利要求1所述的抗FGFR2-IIIc单克隆抗体，其特征在于，所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体与保藏号为CGMCC No.6905杂交瘤细胞株产生的参照抗体相比，具有选自下组的一种或多种特性：

(1)所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体的重链可变区的三个CDR区与所述参照抗体的重链可变区的三个CDR区相同；

(2)所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体的轻链可变区的三个CDR区与所述参照抗体的轻链可变区的三个CDR区相同；

(3)所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体的重链可变区与所述参照抗体的重链可变区相同；和

(4)所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体的轻链可变区与所述参照抗体的轻链可变区相同。

3.如权利要求1所述的抗FGFR2-IIIc单克隆抗体，其特征在于，所述抗FGFR2-IIIc单克隆抗体为保藏号为CGMCC No.6905杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体。

4.一种杂交瘤细胞株，保藏编号：CGMCC No.6905；所述杂交瘤细胞株能够产生抗FGFR2-IIIc单克隆抗体，该抗FGFR2-IIIc单克隆抗体是对SEQ ID NO:4所示的蛋白能特异性结合的单克隆抗体。

5.一种重组蛋白，其特征在于，所述的重组蛋白具有：

(i)如权利要求1所述的单克隆抗体；以及

(ii)任选的协助表达和/或纯化的标签序列。

6.一种免疫偶联物，其特征在于，该免疫偶联物含有：

(a)如权利要求1所述的单克隆抗体；和

(b)选自下组的偶联部分：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、或酶。

7.一种药物组合物，其特征在于，它含有：

(i)如权利要求1所述的单克隆抗体、或如权利要求5所述的重组蛋白、或如权利要求6所述的免疫偶联物；以及

(ii)药学上可接受的载体。

8.如权利要求1所述的单克隆抗体、如权利要求5所述的重组蛋白、或如权利要求6所述的免疫偶联物的用途，其特征在于，用于制备药剂、试剂、检测板或试剂盒；

所述试剂、检测板或试剂盒用于：

(1)检测样品中SEQ ID NO:4所示的蛋白；和/或

(2)检测肿瘤细胞中SEQ ID NO:4所示的蛋白；和/或

(3)检测表达SEQ ID NO:4所示的蛋白的肿瘤细胞；

所述药剂用于治疗或预防表达SEQ ID NO:4所示的蛋白的肿瘤。

9.一种产生抗FGFR2-IIIc单克隆抗体的杂交瘤细胞株的制备方法，包括以下步骤：

(1)以SEQ ID NO:3所示的融合蛋白作为抗原，免疫哺乳动物；

(2)制备表达SEQ ID NO:6所示融合蛋白的CHO-FGFR2-IIIc-Δc细胞株；

(3)将CHO-FGFR2-IIIc-Δc细胞株对所述哺乳动物进行加强免疫；

(4)将加强免疫后的哺乳动物的脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合，培养；筛选，得到分泌对SEQ ID NO:4所示的蛋白有特异性反应的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。

在另一优选例中，所述CHO-FGFR2-IIIc-Δc细胞株的制备为：通过Hind III/Xba I酶切位点将SEQ ID NO:2所示的序列克隆至pcDNA3.0载体中，构建成pcDNA3.0-Flag-FGFR2-IIIc-Δc表达载体；再将pcDNA3.0-Flag-FGFR2-IIIc-Δc表达载体转染到CHO细胞，培养；筛选得到表达SEQ ID NO:6所示融合蛋白的CHO-FGFR2-IIIc-Δc细胞株。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述融合比率是脾细胞：骨髓瘤细胞SP2/0为4.5—5.5:1。