[发明专利]产红景天苷及其类似物的重组菌、构建方法及用途有效
| 申请号： | 201610395330.4 | 申请日： | 2016-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN107460152B | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 赵广荣;李晓波 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P19/44;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300072*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 红景天 及其 类似物 重组 构建 方法 用途 | ||
1.一种产红景天苷及其类似物的重组菌的构建方法，其特征是包括如下步骤：
人工全合成酮基脱羧酶基因synkdc，所述酮基脱羧酶基因synkdc的核苷酸序列如SEQID No.03所示；人工全合成糖基转移酶基因synyjic，所述糖基转移酶基因synyjic的核苷酸序列如SEQ ID No.04所示；
将synkdc基因，通过λRed同源重组技术整合到大肠杆菌BL21(DE3)中，同时敲除基因feaB，得到SyBE-218003菌株；将synyjic基因，通过λRed同源重组技术整合到大肠杆菌SyBE-218003菌株中，同时敲除基因ushA，得到SyBE-218004菌株；
红景天苷类似物为苯乙醇-β-D-吡喃葡萄糖苷。
2.权利要求1的方法构建的产红景天苷及其类似物的重组菌SyBE-218004菌株。
3.产红景天苷及其类似物的重组菌制备红景天苷及其类似物的方法，其特征是包括如下步骤：
将权利要求2的重组菌SyBE-218004接种在LB培养基中，37℃，220rpm，震荡培养2-4h，在OD600到0.8-1.0之间时，加入诱导剂异丙基硫代半乳糖苷使终浓度为0.1-1mM，30℃，200-250rpm诱导3-4h，然后转接到含有葡萄糖的M9培养基中发酵，饲喂酪氨酸或者4-羟基苯丙酮酸使终浓度为500mg/L，发酵培养；或用酶水解的红景天植物原料发酵；高效液相色谱检测，得到红景天苷及其类似物。
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