[发明专利]一种利用东方链霉菌发酵生产万古霉素的种子培养基和培养方法

权利要求书

1.一种利用东方链霉菌发酵生产万古霉素的种子培养基，其特征在于包括一级种子培养基和二级种子培养基，其中

所述一级种子培养基的组成为：

复合变性淀粉8～12g/L、麦芽糊精13～17g/L、鱼粉7～11g/L、丝素粉4～8g/L、玉米浆10～14ml/L、生物氮素2～6g/L、硫酸铵0.5～0.9g/L、轻质碳酸钙1～5g/L、糖化酶0.01～0.05g/L；

所述二级种子培养基的组成为：

复合变性淀粉10～14g/L、麦芽糊精15～19g/L、鱼粉9～13g/L、丝素粉6～10g/L、干酪素3～7g/L、玉米浆14～18ml/L、生物氮素4～8g/L、硫酸铵0.6～1g/L、轻质碳酸钙1～5g/L、糖化酶0.03～0.07g/L、聚醚改性硅0.05～0.09g/L；

所述复合变性淀粉为氧化交联淀粉或交联酯化淀粉。

2.一种利用权利要求1所述的种子培养基的培养方法，其特征在于其工艺步骤包括：

1） 一级种子培养：首先将一级种子培养基灭菌并冷却至25～30℃，并用无菌空气保压，然后在火焰保护下，将已经培养好的东方链霉菌母瓶发酵液按照0.1～0.2L/m³的接种量接入一级种子培养基中进行一级种子培养，至菌体浓度25～30%、pH值6.5～7.5、培养时间10～15h移种；

2） 二级种子培养：首先将二级种子培养基灭菌并冷却至25～30℃，并用无菌空气保压，然后在火焰保护下，将已经培养好的一级种子培养基接入二级种子培养基中进行二级种子培养，至菌体浓度35～40%、pH值6.8～7.6、培养时间15～19h移种发酵。

3.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述一级种子培养基灭菌后的质量要求为：氨基氮40～50mg/100ml、溶磷40～60ug/ml、总糖20～30mg/100ml、pH6～7。

4.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述一级种子培养条件为：罐压0.03～0.05MPa；罐温29～30℃；空气流量20～40m3/h；搅拌转速60～80r/min。

5.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述二级种子培养基灭菌后的质量要求为：氨基氮50～80mg/100ml、溶磷60～70ug/ml、总糖40～50mg/100ml、pH6～7。

6.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述二级种子培养条件为：罐压0.03～0.05MPa；空气流量50～70m3/h；搅拌转速60～80r/min；

罐温：

发酵0～5h：29～30℃；

发酵6～7h：34～35℃；

发酵8h～二级种子培养结束：29～30℃。

7.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述培养好的东方链霉菌母瓶发酵液质量要求为：pH7～8；菌体浓度15～20%；镜检无杂菌。

8.按照权利要求2所述的培养方法，其特征在于所述一级种子的移种比例为1:6-10，以体积比计。