[发明专利]一种小球藻的保存方法

权利要求书

1.一种小球藻的保存方法，其特征在于，所述的保存方法为：

常温下，将小球藻浓缩液与无菌水按体积比1～3：1混合，然后添加甘油、茶叶提取物、山梨酸钾进行保存；所述甘油的质量终浓度为1％～4％、所述茶叶提取物的质量终浓度为1％～4％、所述山梨酸钾的质量终浓度为0.04％～0.08％；

所述的小球藻浓缩液由市购获得的小球藻依次经BG11固体培养基培养，BG11液体培养基培养，离心得到，所得小球藻浓缩液中小球藻的浓度为0.15～0.3g/100mL；

所述的茶叶提取物按如下方法制备得到：取干燥茶叶粉碎，过60～100目筛，得到茶粉，将所得茶粉与水按料液比1：30～50混合，在温度20～40℃、超声波功率20～40KHz条件下提取20～40min，之后离心，收集上清液，滤渣同样条件下二次提取，合并两次上清液，浓缩至固形物含量为20wt％～30wt％，然后冷冻干燥，即得所述的茶叶提取物，备用。

2.如权利要求1所述的小球藻的保存方法，其特征在于，所述甘油的质量终浓度为2％、茶叶提取物的质量终浓度为2％、山梨酸钾的质量终浓度为0.06％。

3.如权利要求1所述的小球藻的保存方法，其特征在于，所述的茶叶选取粗老茶叶。

4.如权利要求1所述的小球藻的保存方法，其特征在于，所述的小球藻浓缩液按如下方法制备得到：

在温度为28℃，光照为65μmol·m^-2·s^-1，光照周期为14h/d条件下，将市面商购获得的小球藻先用BG11固体培养基进行培养8～12天，然后从BG11固体培养基中挑取一环小球藻接入BG11液体培养基，在温度为33℃，光照为65μmol·m^-2·s^-1，光照周期为14h/d，转速为150rpm/min摇床中进行培养8～16天，之后经离心，弃去上清液，即得所述的小球藻浓缩液；所得到的小球藻浓缩液中小球藻的浓度为0.15～0.3g/100mL。

5.如权利要求4所述的小球藻的保存方法，其特征在于，所述的BG11固体培养基的终浓度组成为：1.5g/L NaNO₃、0.04g/L K₂HPO₄、0.075g/L MgSO₄·7H₂O、0.036g/L CaCl₂·7H₂O、0.02g/L Na₂CO₃、0.006g/L柠檬酸、0.006g/L柠檬酸铁、1ml/L微量元素溶液、20.0g/L琼脂；初始pH值为6.5～7.5，溶剂为蒸馏水；

所述的BG11液体培养基的终浓度组成为：1.5g/L NaNO₃、0.04g/L K₂HPO₄、0.075g/LMgSO₄·7H₂O、0.036g/L CaCl₂·7H₂O、0.02g/L Na₂CO₃、0.006g/L柠檬酸、0.006g/L柠檬酸铁、1ml/L微量元素溶液；初始pH值为6.5～7.5，溶剂为蒸馏水；

所述的BG11固体培养基、BG11液体培养基中，所述微量元素溶液的组成均为：每1000mL微量元素溶液中，含有2.86g H₃BO₄、1.81g MnCl₂·4H₂O、0.222g ZnSO₄、0.39g Na₂MoO₄、0.079g CuSO₄·5H₂O、0.0494g Co(NO₃)₂·6H₂O，溶剂为蒸馏水。