[发明专利]一种河蚌血蓝蛋白的提取方法在审
申请号: | 201610315866.0 | 申请日: | 2016-05-13 |
公开(公告)号: | CN107365380A | 公开(公告)日: | 2017-11-21 |
发明(设计)人: | 张洁;曹清林 | 申请(专利权)人: | 上海兆吉生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/18 |
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地址: | 200233 上海市徐*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 河蚌 蛋白 提取 方法 | ||
1.一种从河蚌中提取,纯化,以及冷冻干燥血蓝蛋白的工艺,其特征包括以下步骤:
(1)河蚌样本在45℃(±5℃)温水中预处理,剥离甲壳;
(2)注射器中加入抗凝剂,抽取心脏血;
(3)血液透析后低温离心,取上清,得到血蓝蛋白粗提液
(4)依次用凝胶过滤色谱、阴离子交换色谱层析得到高纯度血蓝蛋白原液
(5)将血蓝蛋白原液加入保护剂进行冻干,制成冻干品。
2.根据权利要求1所述,其中的河蚌不限于软体动物门蚌科的任何一类,只要它的血液中含有血蓝蛋白。
3.根据权利要求1和2所述,其中的河蚌选用的是三角帆蚌。
4.根据权利要求1所述,其中的抗凝剂不限于柠檬酸钠,EDTA(乙二胺四乙酸),肝素,水蛭素,枸橼酸钠等任何一种。
5.根据权利要求1和4所述的方法,其中的抗凝剂是EDTA(乙二胺四乙酸)。
6.根据权利要求1所述,其中所述的保护剂不限于任何一种常规保护剂、赋形剂,只要它或它的配伍有利于血蓝蛋白原液的冻干。
7.根据权利要求1和6所述的保护剂,其中的优选配伍是0.8mol/L glycerol+15%PVP40+150mmol/L海藻糖+2%BSA。
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