[发明专利]同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种同步快速检测配制酒中多种人工合成着色剂的方法，具体涉及一种可同时对配制酒中8种人工合成着色剂进行提取、净化、定量测定的固相萃取/LC-MS/MS方法。

背景技术

人工合成着色剂是通过化学合成的方法生产的有机色素，主要以苯、甲苯、萘等芳烃类化工产品为原料，经过磺化、卤化、偶氮化等一系列有机反应化合而成。其成本低廉、色泽鲜艳、着色力强、性能稳定，在食品生产加工行业中被广泛应用。但人工合成着色剂大多为偶氮类化合物，过量食用可对人体有致畸致癌作用。近年来，为了加强对食用合成着色剂的管理，许多国家对食用合成色素的理化性质及安全性做了深入细致的研究，明确限定了食用合成色素的使用品种、使用范围及使用量。美国严禁在加工食品中使用偶氮玉红、罗丹明B、喹啉黄、萘酚黄、酸性紫6B和亮黑等，允许使用靛蓝、新红；欧盟严禁使用新红、罗丹明B、萘酚黄和酸性紫6B，允许使用靛蓝、偶氮玉红、喹啉黄、亮黑，但有限量要求；我国GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对靛蓝、新红、偶氮玉红、喹啉黄的使用也有严格的限量要求，罗丹明B、萘酚黄、亮黑和酸性6B紫则严禁使用。

目前，国内外用于食品中多种合成着色剂的检测方法主要有分光光度法、高效液相色谱法、高效液相串联质谱法等。分光光度法操作繁琐、定性定量准确度较差。液相色谱法是目前应用最广泛的检测方法，但是缺乏配套的确证技术，无法满足复杂的食品基质中目标物的定性确证要求。已报道的检测食品中合成着色剂的LC-MS/MS方法，只涉及单一系列着色剂且无普适的前处理净化手段。因此，建立一种同时提取、净化、同步快速定量检测配制酒中新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑8种人工合成着色剂的方法变得尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法。该方法同步提取、一次过柱萃取净化、一次色谱过程定量分析配制酒中的8种人工合成着色剂，包括新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑。该方法操作简单、灵敏度高、重现性好、准确率高。

本发明所采用的技术方案为：一种同步快速检测配制酒中8种人工合成着色剂的LC-MS/MS方法，其特征是，

所述的8种人工合成着色剂为新红、靛蓝、酸性紫6B、罗丹明B、酸性红、喹啉黄、萘酚黄和亮黑；

具体包括以下步骤：

(1)制备：取配制酒样品，加热除去乙醇，加入超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至3-6，得待净化溶液；

(2)净化：

a、同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱的组装：取40-60μm阳离子交换填料和40-60μm阴离子交换填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；

b、柱活化：将上述固相萃取小柱依次用pH值6-7的水、甲醇活化；

c、加样淋洗：转移上述待净化液至固相萃取小柱，依次用pH值3-6的水、甲醇淋洗SPE柱；

d、洗脱：低真空吹干SPE柱，用3％-6％的氨化甲醇洗脱待分析成分并接收，收集液于50℃氮气吹干，加水溶解，涡流混合后过0.22μm滤膜，供LC-MS/MS分析；

(3)检测：步骤(2)得到的待测样品用液相色谱-串联四级杆质谱进行测定。

优选的，具体包括以下步骤：

(1)制备：取配制酒样品于烧杯中缓缓加热至70℃搅拌除去乙醇，密封标识，待用；称取样品10g于25mL容量瓶中，加入10mL超纯水，用柠檬酸水溶液调试pH值至3-6，超纯水定容得待净化溶液；

(2)净化：

a、同时萃取8种人工合成着色剂的固相萃取小柱(6mL)的组装：分别称取40-80mg 40-60μm阳离子交换填料和40-80mg 40-60μm阴离子交换填料，填充于底端为聚乙烯筛板的聚丙烯小柱内，填料上端再以聚乙烯筛板固定；

所述的阳离子交换填料为选自苯磺酸键合聚苯乙烯二乙烯苯共聚物(PCX)、苯磺酸键合硅胶(SCX)、丙磺酸键合硅胶(PRS)中的至少一种，优选PCX填料；

所述的阴离子交换填料为选自聚酰胺(PA)、NH₂氨丙基键合硅胶、多胺化聚苯乙烯二乙烯苯共聚物(PWAX)填料中的至少一种，优选PWAX填料；

所述的阳离子交换填料和阴离子交换填料的比例为重量比1:0.5～1:2；优选重量比1：1；