[发明专利]一种用于人源性MANF基因检测的地高辛探针及其应用在审
| 申请号： | 201610301670.6 | 申请日： | 2016-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN107190102A | 公开（公告）日： | 2017-09-22 |
| 发明（设计）人： | 靳令经;蒋明;王玏;朱玮;符星 | 申请（专利权）人： | 上海市同济医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所31272 | 代理人： | 竺路玲 |
| 地址： | 200333 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 人源性 manf 基因 检测 地高辛 探针 及其 应用 | ||
1.一种用于人源性MANF基因检测的地高辛探针，其特征在于，所述的用于人源性MANF基因检测的地高辛探针序列如SEQ NO：1所示。
2.根据权利要求1所述的用于人源性MANF基因检测的地高辛探针在含有MANF基因的重组病毒滴度检测方法中的应用。
3.一种斑点杂交检测方法，其特征在于包括权利要求1所述的地高辛探针。
4.根据权利要求3所述的一种斑点杂交检测方法，其特征在于，所述的斑点杂交检测方法为DNA斑点杂交检测方法。
5.根据权利要求3所述的一种斑点杂交检测方法，其特征在于，所述的斑点杂交检测方法包括以下步骤：
步骤1：标准品和样品DNA变性后分别点加在硝酸纤维素膜的表面；
步骤2：将步骤1中处理得到的硝酸纤维素膜放入杂交缓冲液中进行预杂交；
步骤3：将权利要求1所述的地高辛探针变性后加入到杂交缓冲液中形成探针杂交液，往步骤2处理得到的硝酸纤维素膜上加入探针杂交液，然后温和振荡孵育24小时；
步骤4：将步骤3处理得到的硝酸纤维素膜用洗涤液进行洗涤；
步骤5：将步骤4处理得到的硝酸纤维素膜进行免疫检测。
6.根据权利要求5所述的一种斑点杂交检测方法，其特征在于，所述的硝酸纤维素膜是带正电荷的尼龙膜。
7.根据权利要求5所述的一种斑点杂交检测方法，其特征在于，所述的步骤1中的标准品和样品DNA变性条件为：在95℃下，变性5分钟。
8.根据权利要求5所述的一种斑点杂交检测方法，其特征在于，所述的步骤2中的杂交缓冲液是DIG Easy Hyb缓冲液。
9.根据权利要求5所述的一种斑点杂交检测方法，其特征在于，所述的步骤4中免疫检测的化学显色物是CSPD。
10.根据权利要求3-9中任意一项所述的一种斑点杂交检测方法在含有MANF基因的重组病毒滴度检测方法中的应用。
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