[发明专利]一种与苦瓜抗白粉病基因紧密连锁的分子标记及其应用有效
| 申请号： | 201610279044.1 | 申请日： | 2016-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN105861496B | 公开（公告）日： | 2017-06-16 |
| 发明（设计）人： | 冯诚诚;黄如葵;陈小凤;梁家作;黄熊娟;陈振东;刘杏连;黄玉辉;秦健 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 王正茂 |
| 地址： | 530007 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 苦瓜 白粉病 基因 紧密 连锁 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种与苦瓜抗白粉病基因紧密连锁的分子标记，其特征在于：所述的分子标记的标号为SLAF4542，其具有如Seq ID NO.1所示的序列；所述的分子标记是由引物对Primer Forward inner和Primer Reverse inner、引物对Primer Forward outer和Primer Reverse outer扩增得到的；所述的引物对Primer Forward inner和Primer Reverse inner、引物对Primer Forward outer和Primer Reverse outer分别具有Seq ID NO.2-5所示的序列。
2.一种苦瓜抗白粉病基因的PCR检测试剂盒，所述的PCR检测试剂盒反应体系共10μL：1.0μL浓度30ng/μL的模板DNA；1μmol.L-1的Primer Forward outer 1.0μL；1μmol.L-1的Primer Reverse outer 1.0μL；10μmol.L-1的Primer Forward inner 1.0μL；10μmol.L-1的Primer Reverse inner 1.0μL；10×buffer 1.0μL；2m mol.L-1的dNTP 1.0μL；50μmol.L-1的MgCl2 0.4μL；Taq酶0.1μL；ddH2O 2.5μL，其特征在于，所述的引物对Primer Forward inner和Primer Reverse inner、引物对Primer Forward outer和Primer Reverse outer分别具有Seq ID NO.2-5所示的序列。
3.根据权利要求1所述的与苦瓜抗白粉病基因紧密连锁的分子标记在苦瓜白粉病抗性鉴定中的应用，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待检测苦瓜基因组DNA；
(2)以待检测苦瓜基因组为模板，利用权利3所述的引物对、权利4所述的反应体系，进行PCR扩增反应；
(3)经电泳，如条带扩增出326bp的特异片段，则为高抗白粉病苦瓜；如条带扩增出356bp和326bp的两条特异片段，则为高感白粉病苦瓜。
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