[发明专利]一种快速鉴别骆驼源性成分的荧光定量PCR引物、探针组合物、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.快速鉴别骆驼源性成分的荧光定量PCR特异性引物、探针组合物，其特征在于，包括以下引物和探针，其核苷酸序列如下：

(1)引物

上游引物序列：5'ACAAAATCCCATTCCACCCCT3'，如SEQIDNO.1所示；

下游引物序列：5'CGGCTTAATGTGTGGTGGTG3'，如SEQIDNO.2所示；

(2)探针：

5'FAM-CGTACTGTTCTCACCAGACTTATTAGGA3'，如SEQIDNO.3所示。

2.一种鉴别骆驼源性成分的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述快速鉴别骆驼源性成分的荧光定量PCR特异性引物、探针组合物，以及PCR反应所必需的反应原料和试剂。

3.根据权利要求2鉴别骆驼源性成分的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应所必需的反应原料和试剂包括：PCR缓冲液，MgCL2，dNTPs，Taq酶和超纯水；反应条件为：试剂盒中各组分构成一个20μl的反应体系：2×TaqManMasterMix，pH值为8.9，镁离子浓度为2.5mM，4种dNTP的终浓度各为250μM，Taq酶的用量为1U，所述引物、探针组合物的终浓度为0.4～1μM。

4.权利要求1所述的快速鉴别骆驼源性成分的荧光定量PCR特异性引物、探针组合物或权利要求2所述的鉴别骆驼源性成分的试剂盒在鉴别骆驼源性成分中的应用。

5.一种鉴别骆驼的荧光定量PCR检测方法，其特征在于，取骆驼制品样品，提取基因组DNA，使用利用权利要求1所述引物、探针组合物，或权利要求2或3所述的鉴别骆驼源性成分的试剂盒进行PCR扩增，检测荧光信号，判定。

6.一种鉴定肉制品中骆驼源性成分的实时荧光PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待检样品的基因组DNA，备用；

(2)利用权利要求1所述引物、探针组合物，或权利要求2或3所述的鉴别骆驼源性成分的试剂盒对步骤(1)中提取的基因组DNA进行PCR扩增，收集荧光信号，进行判断，所述PCR扩增程序为：95℃，10min预变性；95℃10s，63℃35s，在此收集荧光信号，45个循环；

(3)结果判读：收集PCR过程中的荧光信号，通过相应的荧光信号扩增曲线、Ct值鉴别待检样本中是否含有骆驼源性成分。

7.根据权利要求6所述的鉴定肉制品中骆驼源性成分的实时荧光PCR检测方法，其特征在于，还设置有非骆驼源性基因组DNA模板作为阴性对照，和骆驼源性基因组DNA模板作为阳性对照。