[发明专利]黑曲霉菌株W35及其在降解赭曲霉毒素A中的应用

权利要求书

1.黑曲霉(Aspergillus niger)W35，其保藏编号为CGMCC No.12104。

2.权利要求1所述黑曲霉W35在降解赭曲霉毒素A中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

将含10⁵-10⁷个孢子的黑曲霉W35孢子悬液接种于含有1-6μg/mL赭曲霉毒素A的500mLYES培养基中，接种量为0.5-3v/v％，于27℃-29℃静置培养13-19天；培养结束后，过滤去除菌丝体，所得上清再用0.45μm滤膜过滤，去除残留霉菌孢子，将500μL所得上清加至离心管中，同时加入终浓度为10-60g/L的赭曲霉毒素A，然后将离心管置于摇床上，36℃-38℃140-160rpm避光保温反应11-13h。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

将含10⁶个孢子的黑曲霉W35孢子悬液接种于含有1μg/mL赭曲霉毒素A的500mL YES培养基中，接种量为2v/v％，于28℃静置培养14天；培养结束后，过滤去除菌丝体，所得上清再用0.45μm滤膜过滤，去除残留霉菌孢子，将500μL所得上清加至离心管中，同时加入浓度为10g/L的赭曲霉毒素A1μL，然后将离心管置于摇床上，37℃150rpm避光保温反应12h。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

将含10⁵-10⁷个孢子的黑曲霉W35孢子悬液接种于含有1-6μg/mL赭曲霉毒素A的500mLYES培养基中，接种量为0.5-3v/v％，于27℃-29℃静置培养13-19天；培养结束后，过滤去除菌丝体，向所得上清中加入硫酸铵固体，使硫酸铵的饱和度达到40％，4℃放置2h，12000rpm离心30min，沉淀用PBS溶液溶解，得溶液I；向溶液I中继续加入硫酸铵固体至硫酸铵饱和度达到60％，4℃放置2h，12000rpm离心30min，沉淀用PBS溶液溶解，得溶液II；向溶液II中继续加入硫酸铵固体至硫酸铵饱和度达到80％，4℃放置2h，12000rpm离心30min，沉淀用PBS溶液溶解，得粗酶液；将500μL粗酶液加至离心管中，同时加入终浓度为10-60g/L的赭曲霉毒素A，然后将离心管置于摇床上，36℃-38℃140-160rpm避光保温反应11-13h。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

将含10⁶个孢子的黑曲霉W35孢子悬液接种于含有1μg/mL赭曲霉毒素A的500mL YES培养基中，接种量为2v/v％，于28℃静置培养14天；培养结束后，过滤去除菌丝体，向所得上清中加入硫酸铵固体，使硫酸铵的饱和度达到40％，4℃放置2h，12000rpm离心30min，沉淀用PBS溶液溶解，得溶液I；向溶液I中继续加入硫酸铵固体至硫酸铵饱和度达到60％，4℃放置2h，12000rpm离心30min，沉淀用PBS溶液溶解，得溶液II；向溶液II中继续加入硫酸铵固体至硫酸铵饱和度达到80％，4℃放置2h，12000rpm离心30min，沉淀用PBS溶液溶解，得粗酶液；将500μL粗酶液加至离心管中，同时加入终浓度为10g/L的赭曲霉毒素A，然后将离心管置于摇床上，37℃150rpm避光保温反应12h。

7.权利要求1所述黑曲霉W35在制备赭曲霉毒素A生物降解剂中的应用。

8.由权利要求1所述黑曲霉W35制备的赭曲霉毒素A生物降解剂。

9.根据权利要求8所述的生物降解剂，其特征在于，其活性成分为黑曲霉W35的发酵液、由其发酵液制备的粗酶液、菌体裂解液或孢子悬液。