[发明专利]基因工程生物指示剂

权利要求书

1.一种基因工程生物指示剂，其特征在于其包括：

菌片，其均匀分布有指示微生物；

内层包装，其确保菌片在保存时处于无菌环境，同时在灭菌过程中有效灭菌因子同菌片接触；

安瓿瓶，其内部密封有芽胞生长培养基和诱导物，其中芽胞生长培养基和诱导物在灭菌过程中与菌片分开，而在灭菌结束后允许同菌片接触，其中所述指示微生物包括嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽胞杆菌、生孢梭菌中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述指示微生物为细菌芽胞。

3.根据权利要求2所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述指示微生物为经过基因工程改造的指示微生物。

4.根据权利要求3所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述指示微生物导入的外源基因包括启动子、报告基因、和选择性标记基因。

5.根据权利要求4所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述启动子包括组成型启动子和至少一种诱导型启动子，其中所述启动子为LacUV5、Trp、Tac、pBAD、T7中的一种或多种，其中LacUV5的来源为乳糖操纵子，Trp的来源为色氨酸操纵子，Tac的来源为结合了色氨酸启动子的-35序列和乳糖启动子的-10序列的基因序列，pBAD的来源为阿拉伯操纵子，T7的来源为T7RNA聚合酶操纵子。

6.根据权利要求4所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述报告基因为增强型绿色荧光蛋白EGFP、突变体红色荧光蛋白RFP、黄色荧光蛋白YFP、蓝色荧光蛋白BFP、蓝绿荧光蛋白CFP中的一种或多种。

7.根据权利要求5所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述选择性标记基因位于诱导型启动子上游，且诱导型启动子不会抑制其表达，所述选择性标记基因包括氨苄青霉素抗性基因、新霉素抗性基因、氯霉素抗性基因、四环素抗性基因、卡那霉素抗性基因、LacZ蓝白斑筛选基因中的一种或多种。

8.根据权利要求7所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述选择性标记基因位于组成型启动子的下游，且不受诱导物调控。

9.根据权利要求4所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述启动子、报告基因、选择性标记基因均使用至少一种质粒和/或病毒被指示微生物摄取。

10.根据权利要求9所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述质粒包括环形双链质粒和线性质粒。

11.根据权利要求9所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述质粒包括一个或多个复制起始位点、一个或多个诱导型启动子、一个或多个报告基因、一个或多个选择性标记基因。

12.根据权利要求9所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述病毒包括一个或多个噬菌体。

13.根据权利要求1所述的基因工程生物指示剂，其特征在于：所述安瓿瓶中包括一种或多种诱导物，所述诱导物为IPTG、吲哚丙烯酸、阿拉伯糖中的一种或多种。

14.根据权利要求1所述的基因工程生物指示剂，其特征在于其用于湿热灭菌、过氧化氢等离子体灭菌、环氧乙烷灭菌、辐射灭菌中的一种或多种。